微生物的活体检查，广泛应用于细菌的形态、特征和酵母菌及真菌的鉴别。

取培养液在显微镜下直接进行活体检查，以判定其是否有菌生长，常用方法有：

（1） 取培养物置洁净载玻片上（固体培养物用生理盐水稀释成适宜浓度后滴于载玻片上）。

（2） 盖上盖玻片，先使一边与液滴接触，慢慢放下。

（3） 将载玻片置显微镜下观察。

（1） 取一凹玻片，在凹窝四周点以少许凡士林。

（2） 取菌悬少许置盖玻片中央，置显微镜下。

（3） 将凹玻片反转，以凹窝的中央处正对液滴，覆盖其上并轻压，使盖玻片粘在凹玻片上（或载玻片上）。

（4） 将凹玻片和盖片一起迅速地反转，置显微镜下观察。

（5） 观察时不要将菌液对准悬滴中央，因为中央液层厚，不易对焦，而应将视野对准液滴的边缘部分。

主要用于厌氧菌的动力检查。

（1） 用长60～70mm、孔径0.5～1mm洁净毛细管，吸入培养液后用喷灯将毛细管两端熔封。

（2） 用胶纸将毛细管两端固定在载物台（或载玻片上），按上法检查。

1. 盖玻片及载玻片均应洁净、无划痕。

2. 注意细菌同杂质的区别。细菌菌体小而透明，常呈淡绿色的小亮点或杆状，呈布朗运动（一种不规则的无定向的颤动），杂质、颗粒则不透明、无布朗运动现象。

3. 检查细菌动力时必须用新鲜的培养物，一般培养16～18h，时间过长，细菌鞭毛常衰退和脱落，有动力的细菌在液体中一般为滚动、摆动或有方向的前进，应与布朗运动或液体的流动相区别。

4. 必要时可在菌液中加入少许0.1%亚甲蓝染色液，易于观察。

将培养物直接放在体视显微镜或生物显微镜低倍镜下直接观察，或用小刀切取霉菌菌落直径约1/3边端部位一小块，用镊子将其小心移至载玻片用低倍镜观察。一般可见菌丝、孢子囊或分生孢子头及其着生情况。若为液体培养物，可用吸管吸取球状生长物，置载玻片上，低倍镜观察，可见其菌丝体。

在洁净玻片上，滴一滴乳酸苯酚液，再用小镊或小刀取霉菌菌落一小块置于其中，并以针将菌丝仔细分开，然后将盖玻片轻轻压上，注意勿形成气泡，在显微镜下观察。此法简便易行，是观察霉菌的常用方法。乳酸苯酚液不仅可杀菌，而且可使菌丝透明、柔软、不易折断。观察霉菌不宜用水制片，由于渗透压差别大，霉菌菌丝易变形、孢子易飞散。

乳酸苯酚液（乳酚油），由苯酚20g加入20ml水中，加热溶解，然后加入比重1.21的乳酸20g和比重1.25的甘油40g混匀制成。

对菌丝分枝和孢子及孢子梗的着生状态观察具有较好的效果。

取圆形滤纸一张，铺于培养皿底部（也可以放2～3个小棉球于皿底），在滤纸上放一U形玻棒，U形玻棒上平放一载玻片，盖好皿盖，灭菌。平皿内注入灭菌琼脂培养基，冷凝后，用灭菌小刀将琼脂切成 1cm ²块，移至载玻片中央。用接种针将孢子悬液接种在琼脂四周，然后盖上灭菌盖玻片。向滤纸或棉球上滴加2～3ml灭菌的20%甘油液以防培养基干燥。盖上皿盖于25～30℃培养。连续观察其自然生长状态和菌丝分枝、孢子梗着生与孢子等细微结构。

本法也可用于培养酵母菌，观察假菌丝；培养放线菌，观察基质菌丝、气生菌丝或孢子丝，但需换用适宜的琼脂培养基。

1. 于洁净载玻片中央，滴加一滴灭菌水。

2. 取一白金铒新鲜培养物于载玻片上，与水混合均匀，或取液体培养物，置载玻片上，覆盖盖玻片。

（1） 在低倍镜下可清楚看到酵母细胞及其出芽繁殖。

（2） 鉴别酵母菌菌细胞，可在盖玻片周围滴加适量的0.1%亚甲蓝液。在显微镜下可见到死细胞被染成蓝色、活细胞无色；因活细胞新陈代谢旺盛，细胞还原能力强，亚甲蓝进入细胞后即被还原成无色。

将待检菌接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中，于28℃培养1～2天，如见液体表面长出一层白色膜状物，取一小块，置载玻片上，加水、铺平后覆以盖玻片，在显微镜下观察。常可见到具明显分枝的假菌丝。

子囊孢子是酵母菌的有性繁殖方式，一般情况下不常见。观察子囊孢子的形成，可将待检菌接于麦氏（McClary）培养基或克氏（Kleyn）培养基上，于28～30℃培养7天。挑取培养物，制片，显微镜下子囊孢子为圆形或椭圆形，或圆柱等其他形态，内有子囊孢子1至数个，子囊孢子多为圆形或其他形态，随种而异。