第三节 红细胞的检验
1.原理 用等渗稀释液将血液按一定倍数稀释，充入计数池后显微镜下计数一定体积内的红细胞数，换算求出每升血液中红细胞的数量。
2.试剂与器材
（1）红细胞稀释液。
枸橼酸钠 1.0g
36%甲醛液 1.0mL
氯化钠 0.6g
加蒸馏水至100mL，混匀，过滤2次后备用。
（2）其他：显微镜、改良Neubauer血细胞计数板等。
3.操作
（1）取中号试管1支，加红细胞稀释液2.0mL。
（2）用清洁干燥微量吸管取末梢血或抗凝血10μL，擦去管外余血后加至红细胞稀释液底部，再轻吸上层清液清洗吸管2～3次，立即混匀。
（3）混匀后，用干净微量吸管将红细胞悬液充入计数池，不得有空泡或外溢，充池后静置2～3分钟后计数。
（4）高倍镜下依次计数中央大方格内四角和正中共5个中方格内的红细胞。对压线细胞按“数上不数下、数左不数右”的原则进行计数。
4.参考区间
成人：男（4.09～5.74）×1012/L；
女（3.68～5.13）×1012/L；
新生儿：（5.2～6.4）×1012/L；
婴儿：（4.0～4.3）×1012/L；
儿童：（4.0～4.5）×1012/L。
5.注意事项
（1）采血时不能挤压过甚，因此针刺深度必须适当。
（2）稀释液要过滤，试管、计数板均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为红细胞。
（3）参考范围数值内，两次红细胞计数相差不得超过5%。
（4）不允许以血红蛋白浓度来折算红细胞数。
6.临床意义 红细胞增加或减少的临床意义与血红蛋白测定相似。一般情况下，红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系。但在病理情况下，此比例关系会打破，因此同时测定二者，对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。
各种贫血患者红细胞形态和着色有不同程度的改变，观察外周血红细胞形态有助于贫血的诊断和鉴别诊断。外周血红细胞变化有以下几种类型。
（一）大小异常
正常红细胞大小较为一致，直径为6～9μm。贫血患者红细胞可表现大小不一。凡直径＞10μm者称大红细胞，直径＞15μm者称巨红细胞，常见于巨幼细胞性贫血、肝脏疾病等；直径＜6μm者称为小红细胞，多见于缺铁性贫血等疾病。
（二）形态异常
1.球形红细胞 通常红细胞直径＜6μm，厚度增加通常＞2.6μm，因而红细胞呈小圆球形，细胞中心区血红蛋白含量较正常红细胞多，常见于下列疾病。
（1）遗传性球形细胞增多症。
（2）自身免疫性溶血性贫血。
（3）异常血红蛋白病。
2.椭圆形红细胞 红细胞呈椭圆形，横径缩短，长径增大，有时可呈畸形。正常人血液中也可见到，但不超过15%。这种红细胞增多见于以下疾病。
（1）遗传性椭圆形细胞增多症，一般要高到25%～50%才有诊断价值。
（2）其他各类贫血椭圆形红细胞都可有不同程度的增多。
3.靶形红细胞 比正常红细胞扁薄，中心有少许血红蛋白，部分可与周围的血红蛋白连接，边缘部染色较中央深，故呈靶状。主要见于以下疾病。
（1）珠蛋白生成障碍性贫血。
（2）严重缺铁性贫血。
（3）一些血红蛋白病。
（4）肝病、脾切除后及阻塞性黄疸等。
4.镰形红细胞 细胞狭长似镰刀，也可呈麦粒状或冬青叶样，主要见于遗传性镰形红细胞增多症。
5.口形红细胞 红细胞淡染区呈裂口状狭孔，正常值＜4%。增高见于以下疾病。
（1）口形细胞增多症。
（2）急性酒精中毒。
6.棘形红细胞 棘形红细胞是一种带刺状的红细胞，刺呈针刺状或尖刺状，见于以下疾病。
（1）棘细胞增多症（遗传性血浆β脂蛋白缺乏症）时，棘形红细胞比例可高达70%～80%。
（2）严重肝病或制片不当。
7.锯齿细胞 锯齿细胞也称短棘形细胞，细胞突起较棘细胞短，但分布较均匀。主要见于尿毒症、微血管病性溶血性贫血、丙酮酸激酶缺乏症、阵发性睡眠性血红蛋白尿等。
8.裂红细胞 裂红细胞指红细胞碎片，包括盔形红细胞等，多见于弥漫性血管内凝血（DIC）和心源性溶血性贫血等。其他也见于化学中毒、肾功能不全、血栓性血小板减少性紫癜等。
（三）染色异常
1.着色过浅 红细胞中心淡染区扩大，多见于缺铁性贫血、地中海贫血及其他血红蛋白病。
2.着色过深 中心淡染区不见，着色较深，多见于溶血性贫血及大细胞性贫血。
3.嗜多色性红细胞 红细胞经瑞氏染色染成灰蓝色、灰红色、淡灰色，细胞体积较正常红细胞稍大，这是一种尚未完全成熟的网织红细胞，多染性物质是核糖体，随着细胞的成熟而逐渐消失，主要见于各种增生性贫血。
（四）结构异常
1.嗜碱性点彩红细胞 用亚甲基蓝染色（或瑞氏染色），成熟红细胞内有散在的深蓝色嗜碱性颗粒，外周血中点彩红细胞增多，表示贫血时骨髓再生旺盛或有紊乱现象，某些重金属中毒时可大量出现。
2.卡波环 成熟红细胞内有染成紫红色的细线状环，呈圆形或8字形，可能是残留核膜所致，见于恶性贫血、溶血性贫血、铅中毒等。
3.染色质小体 成熟红细胞中含有紫红色圆形小体，大小不等，数量不一，可能是残留的核染色质微粒。见于增生性贫血、脾切除后、巨幼细胞性贫血、恶性贫血等。
4.有核红细胞 正常成人血片中不会出现，新生儿出生1周内可能有少量有核红细胞出现。溶血性贫血，急、慢性白血病，红白血病，髓外造血及严重缺氧等在外周血片中常见到有核红细胞。