出生缺陷与遗传性疾病的检验诊断
上QQ阅读APP看书,第一时间看更新

第四节 单纯疱疹病毒感染与先天畸形

一、疾病概述
先天性单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)感染是通过母婴传播常见的先天性病毒感染。HSV属双链DNA病毒,分HSV-1及HSV-2两个血清型。1型主要经口和呼吸道传播,2型主要通过性器官传播。70%~90%原发性生殖器疱疹由HSV-2引起,由HSV-1引起者占10%~30%,复发性生殖器疱疹主要由HSV-2感染引起。
【发病机制】
HSV是嗜神经病毒,经破损的皮肤黏膜进入角质形成细胞,在细胞内复制,细胞肿胀、变性、坏死,产生皮肤损害。感染细胞可与未感染细胞融合,形成多核巨细胞,HSV也可不产生临床症状形成潜伏感染。HSV感染后1周血中出现特异性IgM抗体,2周左右出现特异性IgG抗体,抗体可中和游离病毒,阻止病毒扩散,但抗体不能清除潜伏的病毒,也不能防止疱疹复发。在机体免疫力降低或某些因素如日晒、月经、寒冷、发热、劳累等可激活潜伏的HSV,病毒沿感觉神经轴索下行到末梢而感染邻接的皮肤黏膜细胞并进行增殖,导致局部疱疹复发。由于HSV在体外不易存活,主要由性交直接传播。由于多数HSV-2感染者无症状或症状轻微而成为病毒携带者。孕妇合并HSV感染,HSV可通过胎盘造成胎儿宫内感染或经软产道感染新生儿,以后者多见。单纯疱疹能感染几乎身体的任一皮肤黏膜部位,其中最常见的是口腔和生殖器。HSV-1、HSV-2型在新生儿都可引起疾病。血行播散后肝、肾上腺是常见的受损器官,可见局灶性坏死病变,其周围出现核内包涵体的巨细胞,在多数器官内能找到HSV。
【临床表现】
1.孕期感染及对胎儿、新生儿的影响
(1)孕期原发性感染:
孕期获得的原发性生殖器疱疹感染可能与胎儿宫内生长受限(fetal growth restriction,FGR)和早产的危险性增加有关。真正的孕期原发性生殖器疱疹感染可导致胎儿先天性疱疹感染,其临床表现包括颅内钙化、小头畸形、严重的智力发育迟缓、脉络膜视网膜炎、小眼、视网膜增生和复发性皮肤疱疹感染。如果原发性感染发生在阴道且分娩前4周内,分娩时新生儿感染HSV的概率是50%,其中死亡率50%,存活者严重发病。
(2)孕期复发性感染:
复发阶段似乎不受妊娠影响,复发性感染并不易导致胎儿宫内感染,对妊娠期的长短或新生儿体重没有影响。
2.新生儿疱疹感染的临床表现
新生儿疱疹病毒感染是一种严重的疾病,死亡率为30%~50%,存活的新生儿往往有后遗症。
(1)全身感染:
各内脏受累,多在生后1周发病。其临床表现包括:①非特异性症状如发热、嗜睡、喂养困难、呕吐、黄疸、呼吸窘迫、发作性呼吸暂停、发绀、抽搐、肝大等;②肝、肾、肺及其他器官损害与败血症相似,约占50%的患者;③CNS损害,脑膜脑炎,可表现烦躁、嗜睡、前囟突起、角弓反张、抽搐、昏迷、CSF细胞、蛋白质增加。CNS损害的发生率为60%,其中40%~60%死亡,存活者20%遗留脑积水、神经运动发育迟缓。
(2)局部感染症状:
包括:①皮肤疱疹,直径>1cm,分散成4~5个集聚在一起;②眼部可表现为结膜炎、角膜结膜炎、视网膜炎、晶体混浊,重者可致白内障、角膜瘢痕。
【诊断和鉴别诊断】
除典型病史和临床表现外,单纯疱疹病毒感染的诊断依据有:①水疱液中分离出单纯疱疹病毒;②将水疱液、唾液接种在人胚成纤维细胞或兔肾细胞,培养48小时即可作出判断,并可用免疫荧光技术证实;③在水疱底部刮片行吉姆萨染色后,光镜下见棘突松解,有数个核的气球形细胞和嗜酸性核内包涵体;④借助PCR技术扩增单纯疱疹病毒DNA,诊断可靠;⑤酶免法检测孕妇血清及新生儿脐血清中特异IgG、IgM,若脐血中特异IgM阳性,提示宫内感染。
孕妇妊娠20周前患生殖器疱疹,可以感染胎儿,流产率高达34%。妊娠20周后单纯疱疹病毒感染,低体重儿居多,也可以发生早产。目前认为单纯疱疹病毒宫内感染,严重病例罕见,极少发生先天发育异常。经产道感染最常见,占80%以上。经产道感染的新生儿,由于细胞免疫功能未成熟,病变常表现为全身扩散,新生儿病死率高达70%以上。多于生后4~7日发病,表现为发热、出血倾向、吸乳能力差、黄疸、水疱疹、痉挛、肝大等,多在10~14日因全身症状恶化而死亡,多数幸存者遗留中枢神经系统后遗症。
二、检验诊断
【常规项目】
单纯疱疹病毒IgM和IgG抗体检测
(1)标本来源:
外周血、脐带血、脑脊液,均不抗凝。
(2)检测方法:
酶联免疫吸附试验(ELISA)。
(3)临床诊断价值与评价:
HSV感染早期可以检测到HSV特异性IgM,可持续存在8周,提示为原发感染;在潜伏感染和无症状感染者中检测不到IgM,而且IgM出现不规则,故血清IgM不是复发或无症状再激活的可靠判断指标。因此,HSV IgM检测适用于新生儿疱疹病毒感染诊断和原发感染诊断,而IgG适用于过去和复发感染及隐性感染患者检测;两者均阳性提示近期感染。ELISA法有较好的敏感性和特异性。
【分子遗传学检验】
HSV-DNA的测定
(1)标本来源:
EDTA-K 2抗凝外周血和脐带血、羊水、绒毛、白带。
(2)检测方法:
聚合酶链式反应(PCR)。
(3)临床诊断价值与评价:
HSV-DNA的检测常被作为HSV感染的确认实验。PCR技术应用于先天性HSV感染的诊断具有高灵敏度、高特异性的特点,已显示较大的优越性。已有报道应用核酸杂交技术及PCR技术诊断生殖器疱疹,可提高诊断的敏感性并可进行分型,但需要注意避免污染而出现假阳性。
【其他检验】
1.HSV病毒检测
(1)标本来源:
血、尿、唾液、腹水、脐血、脑脊液、气管灌洗液等。
(2)检测方法:
病毒培养与分离。
(3)临床诊断价值与评价:
HSV病毒检测是诊断的金标准,但操作复杂,费用大。需1~7天,取材于生殖器病损。病损的不同阶段,分离出病毒的可能性不同;如果病损正在结痂,分离到HSV的可能性较病损处于囊泡或溃疡期低。
2.赞克(Tzanck)涂片试验
以玻片在疱疹底部作印片,瑞氏-吉姆萨染色,显微镜下见到具有特征性的多核巨细胞或核内嗜酸性包涵体,此法敏感性低。
【检验应用评价】
生殖器疱疹是由单纯疱疹病毒引起的性传播疾病,主要由HSV-2引起。若有不洁性生活史,根据典型临床表现可作出临床诊断,实验室检查阳性可确诊。HSV病毒培养是诊断金标准,但实用性差。病毒抗原检测及核酸检测是临床比较实用的方法。目前孕妇常规检测的项目为ELISA抗原、抗体检测,若IgM阳性,则进一步借助PCR技术扩增单纯疱疹病毒DNA,阳性可明确诊断。核酸杂交和PCR方法能对潜伏期低复制的HSV特异性DNA进行鉴定,在提高诊断敏感性的同时可进行分型。