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二、诊断重点解读
(一)微生物学及诱发因素
指南对BV的微生物仅简要介绍,指出BV发病相关的微生物包括:阴道乳杆菌减少,而其他细菌增加,其他细菌包括阴道加德纳菌、普雷沃菌属、动弯杆菌、拟杆菌、消化链球菌、阴道阿托普菌( Atopobium vaginae)、BV相关细菌(bacterial vaginosis associated bacteria)和人型支原体等(樊尚荣,2004;Marrazzo,2010;Turovskiy,2011;廖秦平,2011)。
从健康女性阴道可培养分离出5~15种主要细菌,卷曲乳杆菌、詹氏乳杆菌、发酵乳杆菌、加塞乳杆菌和惰性乳杆菌是阴道主要菌群,产过氧化氢(H 2O 2)乳杆菌多种代谢产物有抑菌或杀菌功能,如产H 2O 2乳杆菌减少与BV发病相关。
Gardner和Duke首先提出BV由阴道加德纳菌(当时称阴道嗜血杆菌)感染引起,即单一微生物致病学说(Gardner 和Duke,1955)。之后研究发现,与BV相关的微生物还包括厌氧菌、动弯杆菌和支原体等,即多微生物致病说。BV患者阴道内出现高浓度阴道加德纳菌、普雷沃菌属、消化链球菌、动弯杆菌或人型支原体等,这些BV相关微生物浓度比健康女性阴道中增高100~1000倍(樊尚荣,2004;Josey,2008)。
Ferris等(2004)发现阴道阿托波菌( Atopobium vaginae)与BV发病相关。Fredricks等(2005)应用聚合酶链反应(PCR)检测阴道内细菌,发现BV患者阴道细菌检出率与无BV者显著不同,在BV患者阴道内检出BV相关细菌1 (BVAB1)、BV相关细菌2(BVAB2)和BV相关细菌3(BVAB3)等20余种细菌。Bradshaw等(2006)发现甲硝唑治疗后复发的BV患者阴道阿托波菌检出率较高,合并加德纳菌混合感染也较多见。Ferris等(2007)发现治疗失败的BV患者阴道阿托波菌检出率较高。
阴道阿托波菌、BVAB1、BVAB2和BVAB3等新发现的与BV发病相关的细菌主要根据分子诊断技术发现和确认,这些细菌通常在普通培养甚至厌氧培养条件下无法生长。Fredricks等(2007)根据PCR检出不同细菌诊断BV,发现BVAB1、BVAB2和BVAB3诊断BV的敏感性分别为43.2%、86.4%和42.0%,特异性分别为96.7%、92.9%和96.7%;阴道阿托波菌和阴道加德纳菌诊断BV的敏感性均为96.3%,特异性分别为77.1%和29.5%。
细菌性阴道病患者阴道微生态失衡导致阴道分泌物pH升高,二胺、多胺、有机酸、黏多糖酶、唾液酶、IgA蛋白酶、胶原酶、非特异性蛋白酶、磷脂酶A 2和C、内毒素、白细胞介素1α、前列腺素E 2和F2α浓度升高。这些酶和有机化合物破坏宿主的防御机制,尤其是宫颈的防御机制,促使宫颈、阴道微生物进入上生殖道。pH高达5.5时,会严重地减弱中性粒细胞的吞噬作用和对趋化性刺激的反应。阴道内pH升高同时增加异性间HIV的传播和易感性,并与胎膜早破和早产有关(樊尚荣,2004)。
(二)危害
BV的危害体现在BV可能导致患者发生上生殖器官感染等,主要表现在以下几个方面:
1.子宫内膜炎和盆腔炎
异常子宫出血常由子宫内膜炎所致。子宫内膜炎引起异常子宫出血与受感染的子宫内膜对卵巢激素的异常反应或子宫内膜受到感染或炎症的直接破坏有关。对BV患者口服甲硝唑治疗,可以迅速地缓解子宫出血。手术证实,患有盆腔炎女性的上生殖道分泌物中最常分离出的菌群与BV的菌群一致,包括普雷沃菌属、消化链球菌属、阴道加德纳菌和人型支原体。有超过半数盆腔炎患者合并BV。
2.妇科手术后感染
在手术终止妊娠的女性中,妊娠合并BV女性的盆腔炎发病率高。合并BV患者子宫全切术后阴道断端蜂窝织炎、盆腔脓肿或两者并存的危险性增加。但对手术流产女性口服甲硝唑治疗BV预防术后盆腔炎,目前尚无一致结果,有报道对手术流产女性口服甲硝唑和多西环素治疗BV不能降低术后感染率(Miller,2004)。
3.宫颈癌
BV、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)以及生殖道人乳头状瘤病毒感染有相同的流行病学特征,BV的厌氧菌代谢可产生胺及有致癌作用的亚硝基胺。BV患者阴道分泌物中存在高浓度磷脂酶C和A 2,后者能增加人乳头状瘤病毒感染的易感性,这些可能在宫颈上皮细胞转变方面起一定的作用,但BV是否与CIN相关,目前尚无一致结果。
4.HIV感染
BV可增加异性间HIV传播的危险性。当pH增加时,HIV的生存能力和黏附能力增加,并且可能使传播更为容易。同时,BV可改变阴道分泌物的其他理化性质,这些变化可改变宿主的防御机制,使HIV易感性增加。
5.不育和流产
BV患者输卵管因素不育症的发生率增高。在助孕治疗中,BV患者和非BV患者的胚胎种植率相似,但BV患者早孕期流产率高于非BV者。输卵管因素不孕患者BV发生率增高。
6.羊膜绒毛膜炎、胎膜早破、早产和低出生体重儿
BV患者阴道内细菌可通过胎膜进入羊膜腔,导致羊膜炎及羊膜绒毛膜炎,并可进一步发展为胎膜早破、早产和分娩低出生体重儿。
7.产后子宫内膜炎及剖宫产后伤口感染
剖宫产分娩的BV患者手术后腹部伤口感染和子宫内膜炎发生率较非BV患者高。从这些患者产后子宫内膜炎部位常可培养出与BV相关的阴道加德纳菌及厌氧菌如普雷沃菌属和消化链球菌等。
(三)临床诊断
大约半数的BV患者无临床症状,主要根据临床诊断(Amsel标准),即患者出现下列4项临床特征中包括线索细胞阳性在内的至少3项可诊断为BV:①线索细胞阳性;②胺试验阳性;③阴道pH大于4.5;④阴道均质稀薄分泌物(Amsel,1983;樊尚荣,2004;Marrazzo,2010)。
1.线索细胞
与正常的边界清晰的阴道上皮细胞相比,线索细胞边界模糊。在有细菌性阴道病存在的情况下,除了线索细胞以外,显微镜检查还可以发现细菌的种类和数量发生明显改变,很难看到长杆状乳酸杆菌。镜下的细菌在数量上明显增加,短杆状和球杆状菌占优势。阴道分泌物湿片检查线索细胞是细菌性阴道病唯一特异和敏感的诊断指标,根据线索细胞能准确地预测85%~90%的细菌性阴道病患者。
2.胺试验(whiff test)阳性
阴道分泌物加10%氢氧化钾释放出特殊难闻的“鱼腥味”或氨味为胺试验阳性。有氨味存在对诊断细菌性阴道病有很高价值。氨味释放常不敏感,缺乏氨味并不能排除细菌性阴道病。
3.阴道pH大于4.5
正常阴道内的pH为3.8~4.2,pH大于4.5对诊断细菌性阴道病最敏感,但特异性低。阴道中的精液、宫颈黏液、经血、滴虫性阴道炎及需氧菌性阴道炎等可使阴道分泌物pH升高。
4.阴道均质稀薄的分泌物
典型表现为白带增多和伴腥臭味,超过27%的细菌性阴道病患者有明显的“泡沫”样阴道分泌物。尽管患有细菌性阴道病的女性常常有分泌物增多的陈述,但分泌物的量经常不同,可以为很少、中等或很多。
(四)革兰染色涂片诊断
应用阴道涂片革兰染色镜检诊断BV首先由Spiegel等(1983)报道,BV的阴道涂片特征为阴道加德纳菌、普雷沃菌形态小杆菌或球菌及革兰变异动弯杆菌形态的小弧菌占优势,并且乳酸杆菌形态大杆菌缺乏。根据阴道革兰染色涂片诊断BV的敏感性和特异性均超过90%(樊尚荣,2004)。
Nugent等(1991)报道应用阴道涂片细菌评分诊断BV。在油镜下区分乳杆菌样细菌(革兰阳性大杆菌),阴道加德纳菌和拟杆菌样细菌(革兰染色不定或阴性杆菌)以及动弯杆菌样细菌(革兰染色不定弯曲杆菌)3类细菌,根据下表的评分标准,将3类细菌进行评分,然后相加,BV的诊断标准为≥7分;积分在4~6分为临界范围;积分在0~3分为正常(表2.1)。阴道涂片革兰染色镜检诊断BV具有更好的重复性,标本可长期保存,适用于临床诊断和科学研究。指南建议有条件者可采用阴道涂片Nugent评分诊断BV。
表2.1 阴道分泌物革兰染色Nugent评分标准
注:按每10个油镜视野下(×1000倍)观察到的每类细菌形态的平均数量进行计数并分配分值:0:未见细菌;1 +:少于一个细菌;2 +:1~4个细菌;3 +:5~30个细菌;4 +:30个以上细菌。三类细菌总分值≥7分为细菌性阴道病
(五)诊断方法比较
比较应用临床诊断、革兰染色阴道涂片及巴氏涂片在妊娠期诊断BV的价值,以革兰染色阴道涂片诊断作金标准,发现临床诊断BV的敏感性和特异性分别为35%和99%。以Amsel标准为金标准,革兰染色阴道涂片诊断BV的假阴性率为4%,阴性预测值为96%。以临床诊断做金标准,巴氏染色涂片诊断BV的敏感性和特异性分别为49%和93%(樊尚荣,2004)。目前并无资料证明任何一种BV诊断方法在孕期诊断BV更优越。指南指出无需常规对孕妇进行BV筛查。评估对有早产高风险孕妇筛查BV是否有益仍无一致意见。对有症状的妊娠期诊断的BV,均给予口服抗生素治疗(见后文治疗部分)。