第八章　交叉配血试验的相关问题

受血者血清与供者红细胞反应，检测受血者血液中是否存在针对供者红细胞的抗体。

受血者红细胞与供者血清反应，检测供者血液中是否存在针对受血者红细胞的抗体或ABO不相容抗体。一般输注红细胞的交叉配血，只检测ABO相容问题，次侧配血不具临床意义，因此原则上若要进行次侧交叉配血，只要盐水介质配血即可，可以不使用抗人球蛋白法或微柱凝胶抗人球蛋白卡来进行次侧交叉配血。

受血者红细胞与自身血清反应，以排除自身抗体、自身红细胞直接抗人球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假凝集等因素干扰实验结果判读。

是最古老的一种配血实验，当受血者和献血者的细胞与血清经混合并离心后，如有ABO不配合问题，就会很快显示出来，所以常称为“立即离心”配血实验。临床上多与其他能检出不规则抗体的配血实验（如抗人球蛋白试验等）联合使用。

操作简便，检测速度快，成本低。

只能检测出完全抗体（如天然抗体IgM、一般ABO血型抗体），不能检测出不完全抗体（如免疫性抗体IgG）。而经常会造成急性血管内溶血的抗体或者迟发性溶血性输血反应的抗体常为免疫性IgG抗体，使用盐水介质法交叉配血，无法检测出有临床意义的抗体，容易出现假阴性结果，不能单独用于交叉配血。

又称为Coombs’试验，是检测不完全抗体的经典方法，主要用于检测血清中的不完全抗体和（或）补体，避免ABO以外的血型抗体漏检。

检测IgG抗体最为可靠的方法，灵敏度高，特异性好，抗体的检出率高。

耗时长，对技术要求高，不利于急诊、手术配血；灵敏度很高，假阳性反应的发生率相应升高，若献血者直抗阳性或者患者本身直抗阳性都可能会造成主侧配血的假阳性或次侧配血的假阳性。

聚凝胺是一种高价阳离子季铵盐多聚物，溶解产生的正电荷能中和红细胞膜表面带有负电荷的唾液酸，使红细胞的Zeta电位降低，红细胞之间距离缩短，使红细胞发生非免疫性的可逆聚合。当再次加入悬浮液，悬浮液主要是枸橼酸钠，枸橼酸钠的负电荷能参与聚凝胺上的正电荷中和，使非免疫性的可逆聚合现象消失。1983年Fisher比较了用盐水介质法、酶介质法、低离子盐水抗人球蛋白法及聚凝胺法4种不同的方法检出特异性抗体的能力，发现聚凝胺法测出特异性抗体的灵敏度高出其他方法2~250倍，是一种快速、简便检测红细胞不完全抗体的方法，可用来检测IgG抗体，但Kell系统的抗体除外。

敏感性高，操作简便，速度快，准确，应用范围较广，结果易判断。

多数IgG类抗体能够被检出，但抗-K抗体除外；敏感度高，易筛检出不具临床意义的冷反应抗体。

酶介质法是指利用蛋白水解酶抗原破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸，使红细胞失去负电荷，导致红细胞表面Zeta电势减小、排斥力减弱、距离缩短。同时酶介质法可以改变红细胞表面的部分结构，使某些隐蔽的抗原暴露出来。这样，IgG类抗体可与经过酶处理的红细胞在盐水介质中发生凝集。

酶介质交叉配血试验既能检出不相合的完全抗体，又能检出不相合的不完全抗体，从而使ABO系统抗体以外其他血型系统的绝大多数IgG类抗体得以检出，提高了输血的安全性。

木瓜酶和菠萝蛋白酶不能检出MNS和Duffy血型系统中的某些抗体，导致假阴性结果，存在输血安全隐患，而且酶会产生非特异性凝集，会产生假阳性结果。

红细胞出现凝集反应或溶血为阳性结果。

红细胞呈游离的混悬状态为阴性结果。

为阳性结果，与血液凝集具有同样重要的临床意义。有些血型抗体与红细胞表面相应抗原反应后，能够激活补体，引起红细胞溶解，具有这种性质的抗体为溶血素。当补体不存在时，这些抗体往往凝集或致敏具有特异性抗原的红细胞。血型抗体中具有溶血作用的有抗-A、抗-B、抗-A，B、抗-I、抗-i等。

（1）若阳性对照管红细胞凝集，阴性对照管红细胞不凝集，受血者、供血者盐水对照管不凝集，主侧、次侧配血管都不凝集，表明配血相合，可输用。

（2）若阳性对照管红细胞凝集，阴性对照管红细胞不凝集；受血者、供血者盐水对照管不凝集，主侧、次侧配血管中的红细胞在一管或两管内凝集，表明配血不相合，禁忌输血。

（3）若阳性对照管红细胞凝集，阴性对照管红细胞不凝集，但盐水对照管凝集，表明反应体系有问题，实验结果不可信，应当重新实验。

（4）若实验结果阴性，要对该实验进行核实。在实验结束后，在主侧和次侧管中各加入1滴IgG型抗D致敏的O型红细胞，离心后应当出现红细胞凝集现象，表示试管内的抗球蛋白试剂未被消耗，阴性结果可靠；如果没有出现红细胞凝集则表示交叉配血结果无效，须重新实验。

（1）若主侧管和次侧管内红细胞凝集散开，则为聚凝胺引起的非特异性反应，表示配血相合，可以输用。

（2）若主侧管和次侧管或单独一管内红细胞凝集不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，表示配血不相合，禁忌输血。

（3）溶血标本不能用于交叉配血，因为配血试管中发生溶血现象，表明有抗原抗体反应，同时还有补体参与，是配血不合的严重情况。

（4）抗体筛选试验与交叉配血试验结果均为阳性，表示受血者血清中有同种抗体，且与此供血者血液不合。如果血清中存在同种异体抗体，该抗体筛查和交叉配血就可能是阳性，只要血清中存在同种异体抗体，就应该选择抗原阴性红细胞输血。建议对受血者血清做抗体鉴定试验，再与相配合的供血者做交叉配血试验。

（5）抗体筛选试验阴性，交叉配血试验阳性，主侧阳性表明受血者血清中含有稀有的同种抗体，或者供血者血标本被污染/供血者直抗阳性，建议对受血者血清做抗体鉴定试验、重新留取血袋连接管中的献血者样本及供血者做直抗试验；抗体筛查试验阳性，交叉配血试验阴性，表示受血者血清中有同种抗体，但与此供血者血液配合，建议对受血者血清做抗体鉴定试验。

凝胶卡抗筛阴性，凝胶卡交叉主侧相合，但聚凝胺法交叉主侧不合应如何处理？

常见的情形是：

（1）冷反应型抗体（如抗-Le ^a，抗-Le ^b，抗-M，抗-P等IgM抗体）。

（2）冷凝集素（冷自身抗-I或抗-IH）。

（3）聚凝胺敏感性抗体。

通常聚凝胺法比微柱凝胶卡法还敏感，但需要使用标准的聚凝胺试剂和规范的操作。一般来说，聚凝胺法对冷抗体较敏感，可确认是否为冷抗体还是冷凝集素。区分冷凝集素和冷反应同种抗体，一般采用聚凝胺抗筛加自身对照，若聚凝胺抗筛及自身对照全为阳性结果，则可能为冷凝集素；若聚凝胺抗筛结果有阳性和阴性且自身对照为阴性时，则存在冷反应同种抗体。这种IgM抗体在凝胶卡中做不出来，可以使用聚凝胺法来做抗体鉴定（用谱细胞），检出同种抗体，交叉配血时避开抗原做聚凝胺交叉相合，此袋血就可安全输注。