抗体分子和补体成分都是球蛋白，用人球蛋白免疫动物使其产生抗体即抗人球蛋白。抗人球蛋白试剂能凝集被人球蛋白致敏的红细胞，抗人球蛋白试剂可以和致敏在红细胞上的人球蛋白反应，通过桥联作用使致敏红细胞出现凝集，呈现阳性反应。根据是否含补体成分，抗人球蛋白试剂分为单特异性和多特异性。抗人球蛋白试剂使用前要先进行标化，选择最佳稀释度。

补体可在体内或体外致敏红细胞。在体外检测红细胞时，单纯的抗-C3阳性常由具有冷自身抗体性质的IgM类抗体造成。

某些患冷凝集病的患者，血浆中存在的冷自身抗体在32℃也能够与红细胞反应。当血液流经外周循环时，温度较低，红细胞被冷自身抗体致敏，然后补体吸附到红细胞上，致敏红细胞流回中心循环时，温度升高到37℃，冷抗体被释放到血液中，而补体成分仍然牢固地吸附在红细胞上。

当含有IgM性质的冷自身抗体的标本在体外较冷的环境中保存时，IgM会与红细胞结合，并造成大量补体致敏，在较高的温度或反复洗涤中IgM抗体会从红细胞上脱落，但补体仍留在红细胞上。血浆内形成的免疫复合物能够很弱并非特异性地结合到红细胞上，引起补体包被，在免疫复合物解离后，只留下激活的补体继续附着于红细胞膜上，此时只有C3d能被特异性检出。

单抗IgG阳性，说明红细胞表面致敏了IgG免疫球蛋白，确认致敏在红细胞上的IgG类抗体的特性。常用的方法是选择合适的放散液，将IgG抗体从红细胞上放散下来，然后进行抗体鉴定。

（1）自身抗体自身对照阳性，放散液与谱细胞反应出现强度一致的凝集，且无格局，此时一般难以确认抗体特异性，考虑为自身抗体。

（2）同种抗体放散液与谱细胞反应有特异性格局，此时可选择相应抗原缺失的血液进行交叉配血。

（3）药物抗体单抗IgG结果阳性，放散液与谱细胞反应呈阴性，可能提示为药物抗体致敏。

微柱凝胶卡法抗体筛检阴性但交叉配血不合的原因？

常见原因有下列几种：

（1）抗筛细胞上缺乏低频率抗原，如Mur、Di ^a、Wr ^a、Bg ^a等。

（2）抗筛细胞上缺乏某些抗原阳性细胞，如Fy ^b、S等，而献血者这类抗原阳性。

（3）抗筛细胞上存在剂量效应，且抗筛细胞抗原为杂合子（常见如Fy ^b和S），但献血者是纯合子。