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第二节 标本采集及处理
硬下疳与皮肤黏膜损害的组织渗出液，淋巴结穿刺液，脑脊液，妊娠妇女羊水，以及病理组织等样本适合于梅毒螺旋体镀银染色检测。详见样本的采集与质量控制章节。
一、样本采集
（一）皮肤溃疡取材
溃疡常见于男性阴茎体、龟头和冠状沟等部位；女性常见于阴阜、大小阴唇等部位，还可见于口腔、宫颈口和肛周部位。一期梅毒硬下疳、二期梅毒疹和扁平湿疣等病期的病损部位。取材前先用棉拭子将皮损部位污物擦去并用无菌生理盐水清洁皮损表面，如有痂皮，可用消毒钝刀除去，用手挤压皮损周围，使组织液渗出，用钝刀或盖玻片轻轻地刮取组织液，避免出血。
（二）淋巴液取材
消毒淋巴结表面皮肤，用注射器以无菌操做穿刺淋巴结并注入灭菌生理盐水，再吸入注射器内，如此反复二三次，抽取淋巴液。
（三）羊水穿刺
梅毒妊娠妇女的羊膜穿刺术应由专业人员操作。
（四）脑脊液（CSF）取材
由专业人员采用腰椎穿刺术获得脑脊液。
（五）病理组织
由专业人员切取病理组织。
二、样本处理
（一）皮肤溃疡组织液
将渗出组织液均匀地涂布于玻片上，空气中自然干燥。
（二）淋巴液
将抽取的淋巴液直接滴在玻片上，均匀地涂布制成涂片，空气中自然干燥。
（三）羊水穿刺液
将羊水离心（1500g×30分钟）沉淀梅毒螺旋体，小心去除上清液，将沉淀物混匀后均匀涂片，空气中自然干燥。
（四）脑脊液
如果样本量少，将脑脊液直接滴在玻片上制成涂片。如果样本充足，可采取离心（1500g×30分钟）沉淀梅毒螺旋体，小心去除上清液，将沉淀物混匀后均匀涂片，空气中自然干燥。
（五）病理组织
1.病理组织压片
将未经固定的新鲜组织小块压印玻片上，空气中自然干燥。
2.常规病理组织切片
切片后，应进行脱蜡后才能用于镀银染色。脱蜡步骤：
（1）脱蜡前，应将组织切片放置室温下60分钟或60℃恒温箱中20分钟干燥。
（2）脱蜡
1） 将组织切片置于二甲苯溶液中浸泡15分钟。
2） 更换二甲苯溶液再浸泡10分钟。
3） 更换50%二甲苯溶液中浸泡5分钟。
（3）水化
1） 无水乙醇中浸泡5分钟。
2） 更换无水乙醇再浸泡5分钟。
3） 置于95%乙醇中浸泡5分钟。
4） 置于90%乙醇中浸泡5分钟。
5） 置于80%乙醇中浸泡5分钟。
6） 置于70%乙醇中浸泡5分钟。
7） 蒸馏水冲洗。
制好溃疡渗出液涂片或组织压片，空气干燥后于4～8℃可储存1个月，−20℃可储存数月到数年。运输时使用硬纸盒或泡沫聚苯乙烯盒包裹，以防止玻片破裂。或直接将体液样本放入密闭的容器中，再装入密闭的塑料袋中运输。