梅毒的实验室诊断方法包括病原学及血清学检测两大类。

病原学检测方法是通过直接检测患者皮损、组织、淋巴结液、羊水、脑脊液等体液样本的梅毒螺旋体而诊断梅毒。病原学检测是特异性检测，检测阳性即可以确诊梅毒。常用的病原学检测方法包括暗视野显微镜检查法，镀银染色法，核酸扩增法和直接免疫荧光检测等。

血清学检测方法包括非梅毒螺旋体抗原血清学试验与梅毒螺旋体抗原血清学试验。非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测非梅毒螺旋体抗体（抗类脂质抗体），常用方法包括性病研究实验室试验（VDRL），不加热血清反应素试验（USR），快速血浆反应素试验（RPR），甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等。梅毒螺旋体抗原血清学试验检测特异性梅毒螺旋体抗体，常用方法包括梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA），梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA），荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS），梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TPELISA），免疫印迹（TP-WB），化学发光（TP-CLIA），免疫层析快速检测法等。各期梅毒的血清学变化见图3-1。

皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体；非梅毒螺旋体抗原血清学试验在感染不足2～3周时，该试验可为阴性，于感染4周后复查为阳性；梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性，但极早期（窗口期）可为阴性。

二期皮损尤其扁平湿疣、湿丘疹及黏膜斑等可查见梅毒螺旋体；非梅毒螺旋体抗原血清学试验100%阳性；梅毒螺旋体抗原血清学试验100%阳性。

非梅毒螺旋体抗原血清学试验71%～73%阳性；梅毒螺旋体抗原血清学试验约90%阳性。脑脊液检查白细胞计数≥10×10 ⁶/L，蛋白量＞500mg/L，脑脊液VDRL试验约50%阳性；组织病理检查有三期梅毒的组织病理学变化。

非梅毒螺旋体抗原血清学试验，对于无既往梅毒史者，非梅毒螺旋体抗原试验阳性；对于有既往梅毒治疗史者，与前次试验结果相比，试验结果阳转或其滴度升高4倍或更高。梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性。脑脊液检查无异常。

神经梅毒脑脊液检查白细胞计数≥10×10 ⁶/L，蛋白量＞500mg/L。脑脊液VDRL试验是诊断神经梅毒的标准血清学试验，特异性高，但敏感性较低。因此，脑脊液VDRL阳性可诊断神经梅毒，但阴性时不能排除神经梅毒。FTA-ABS试验的敏感性高，其阳性不能诊断神经梅毒，但其阴性可排除神经梅毒。脑脊液特异性梅毒螺旋体IgM抗体阳性或脑脊液中梅毒螺旋体检测阳性可诊断神经梅毒。

出现下列指标之一可诊断为先天梅毒：①患儿皮肤黏膜损害可查见梅毒螺旋体；②非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度持续上升；③非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度同比高于母亲4倍（低于或等于并不能完全排除先天梅毒）；④梅毒螺旋体特异性IgM抗体阳性；⑤患儿随访18个月后梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性。