生物化学与分子生物学实验与学习指导
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上篇 实验

第一章 绪论

一、实验须知

(一)生物化学与分子生物学实验的目的

(1)使学生通过实验懂得设计实验的基本思路,掌握各个实验的基本原理,学会严密地组织自己的实验,合理地安排实验步骤和实验时间。

(2)使学生通过实验学会熟练地使用各种生物化学与分子生物学实验仪器,包括各种天平、分光光度计、离心机、各种电泳装置和摇床等。

(3)使学生通过实验学会准确翔实地记录实验现象和数据,提高实验报告的写作能力,培养严谨细致的科学作风。

(4)使学生通过实验加深对生物化学理论知识的理解。

(5)使学生通过实验学会科学地分析问题,具备初步解决问题的能力,撰写并养成实事求是的工作作风。

(6)使学生通过实验掌握生物化学的各种基本实验方法和实验技术,为今后参加科研、撰写毕业论文和工作打下坚实的基础。

(二)实验室规则及常识

(1)严格遵守实验课纪律,不得无故迟到或早退。不赤脚、不穿拖鞋进入实验室,必须穿白大衣才能进入实验室。

(2)严禁高声说话,严禁拿器械及动物开玩笑或虐待动物,严禁在实验室内吸烟、饮水、吃零食及用餐。

(3)使用仪器时,严格按操作规程使用,凡不熟悉操作方法的仪器不得随意动用,对贵重的精密仪器必须先熟知使用方法,才能开始使用;仪器发生故障时,应立即关闭电源并报告老师,不得擅自拆修。

(4)为避免试剂的相互污染,取用试剂时必须“随开随盖”“盖随瓶走”,用后立即盖好放回原处,切忌“张冠李戴”。

(5)注意水、电、试剂的使用安全。使用易燃、易爆物品时应远离火源。用试管加热时,管口不准对人。严防强酸、强碱及有毒物质吸入口内或溅到别人身上。任何时候不得将强酸、强碱、高温、有毒物质抛洒在实验台上。

(6)废纸及其他固体废物严禁倒入水槽,应倒入垃圾桶内。废弃液体若为强酸、强碱溶液,必须事先用水稀释,方可倒入水槽内,并放水冲走。

(7)爱护公物,节约水、电、试剂,遵守损坏仪器的报告、登记、赔偿制度。

(8)实验完毕,个人应将相关试剂、仪器器材摆放整齐,用过的玻璃器皿洗净放好,整理实验台台面,做好清洁,方可离开实验室。值日生则要认真负责整个实验室的清洁和整理,保持实验室整洁。断水、断电,关好门窗,并严格执行值日生登记制度,经老师同意后方可离开。

(三)生化实验课的要求

(1)实验课前要做好充分的预习,预习的内容包括实验目的、原理、内容、操作规程及要点、注意事项等,写出预实验报告。

(2)实验前认真听取老师的讲解,严格按操作规程或实验指导老师的要求进行操作,仔细观察实验现象。实验过程中自己不能解决或决定的问题,切勿盲目处理,应及时请教指导老师。要求独立完成的实验要学会独立操作;与同学合作完成的实验要做好分工、配合、协调工作。在实验过程中不做与实验无关的事情,也不要妨碍他人做实验。

(3)实验数据和现象应随时记录在实验本上。记录实验结果要实事求是,仔细分析,做出客观结论。若实验失败,必须认真查找原因,而不要任意涂改实验结果。实验完毕,认真书写实验报告,按时上交。

二、实验记录及实验报告的书写

(一)实验记录

实验课前应认真预习、将标题、实验目的和原理、实验内容、方法和步骤、记录、数据处理及结果分析等简单扼要地写在记录本或实验报告本上。

实验中所观察到的现象和测量的数据应及时、准确、真实地记录。原始记录应准确、简练、详细、条理清楚、字迹端正。不得用铅笔记录,只能用钢笔和圆珠笔,不要擦抹和修改,但可以划去重写。

在实验条件下观察到的现象,应准确详尽地记录实验现象的所有细节而不是照抄实验书上所列应观察到的实验结果。记录实验结果时,应做到正确记录,切忌夹杂主观因素,切忌拼凑实验数据、结果。如报告一个特殊实验中生成一种黄色沉淀是不够的,要写明在什么条件下(比如加热到什么温度、保温多长时间)、什么时候(快速还是缓慢)、生成多少、什么形状(胶状还是絮状或是颗粒状)、什么颜色(亮黄色、橘黄色或是其他颜色)的沉淀。

对于不正常的现象和数据更应如实记录,并分析、查找原因。在科学研究中仔细观察,特别注意未预期的实验现象是十分重要的,这些观察常常会引起意外的发现,而且为了避免重复工作也需要准确地书写实验报告。使用精密仪器时还应记录仪器的型号及编号。

在定量实验中观测的数据,如称量物的重量,滴定管的读数,分光光度计的读数等,都应设计一定的表格准确记下正确的读数,并根据仪器的精确度准确记录有效数字。实验记录上的每一个数字,都会反映每一次的测量结果,所以,重复观测时即使数据完全相同也应如实记录下来。

如果发现记录的结果有疑问、遗漏、丢失等,都必须重做实验。实验中要记录的各种数据,都应事先在记录本上设计好各种记录格式和表格,以免实验中由于忙乱而遗漏测量和记录,造成不可挽回的损失。将不可靠的结果当作正确的结果记录,在实际工作中可能造成难以估计的损失。所以,在学习期间就应一丝不苟,努力培养严谨的科学作风。

(二)实验报告

获得了准确的实验结果不等于实验结束。实验室工作的目的是用一种简明易懂的方式向人传播实验结果和所引出的概念。而传播实验结果和所引出的概念的最好的方法就是书写实验报告。同时,书写实验报告也是对学生将来撰写科研论文的一种极好的练习。

书写实验报告可以用实验报告纸,但最好用练习本。为避免遗失,实验课全部结束后应把所有实验报告装订成册以便保存。

实验结束后,应及时整理和总结实验结果,写出实验报告。

书写实验报告的注意事项包括以下内容:

1.标题 课程和实验名称、实验者姓名、实验日期等都应写在实验报告上。

2.实验目的和原理 简明扼要地写出实验目的、原理,涉及化学反应的最好用化学方程式表示。

3.实验内容 列举本次实验的主要内容。

4.方法和步骤 列出简单明了的操作步骤,以便自己将来或他人能够重复,尽量用流程图或表格表示。

5.记录 实验记录应及时、准确详尽、真实、清楚。

6.数据处理及结果分析 根据实验要求整理、归纳数据后进行计算得出结果,包括根据实验数据及计算结果做出的各种图表(如曲线图、对照表等)及从图表中得出的结果。

7.讨论 讨论部分不是对结果的重复,而是对实验结果、实验方法和实验异常结果的分析和探讨,以及对实验设计的认识、体会及建议。

8.结论 结论要简明扼要,以说明本次实验所获得的结果。

9.画图 在许多实验中,都有一个量,如浓度、pH或温度,它们在系统地变化着,要测量的是此量对另一量的影响。已知量叫自变量,未知量叫应变量。画图时,习惯把自变量画在横轴上而把应变量画在纵轴上。下面列一些作图的提示:

(1)为了清楚起见,调整标度使斜度约为45°。

(2)每一幅图都应有简洁的标题:清楚地标明两个轴的名称及计量单位。

(3)两轴均要标清刻度标记,选用合适的单位以使轴上的数字不要太大。且最好用简单数字标明轴上的标度(如使用10mmol/L就比0.01mol/L和10000μmol/L要好)。

(4)尽可能使各点间距离相等,不要使各点挤在一起或距离太大。

(5)根据不同的实验用光滑连续的曲线或直线连接各点。

(6)若同一张图上有两条以上的曲线,应用不同的符号分别标明相应的测定点。

(杨剑萍)