三、实验内容

（一）细胞的基本形态观察

1.原理

细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点，在分化程度较高的细胞中更为明显。这是生物漫长进化过程的产物，从进化观点看有一定合理性。例如：具有收缩功能的肌细胞伸展为细长形；具有感受刺激和传导冲动功能的神经细胞有长短不一的树状突起；游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。不论细胞的形状如何，光学显微镜下细胞的结构一般分为三大部分，即细胞膜、细胞质和细胞核。但也有例外，如哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核。

2.观察方法与结果

（1）人口腔黏膜上皮细胞标本的制备与观察：取清洁牙签，用钝端在自己口腔内腮面轻刮少许黏液，并弃掉。换支牙签，在原位稍用力刮取上皮细胞，均匀涂在一张干净的载玻片中央（不可反复涂抹），滴1滴甲苯胺蓝染液，染色5min，盖上盖玻片，吸去多余染液。先在低倍镜下观察，可见视野中有许多单个或成堆的被染成蓝色的细胞，即人口腔黏膜上皮细胞。细胞呈多边形或椭圆形，细胞中央有一染成深蓝色的细胞核，核周围均质部分为细胞质，细胞外表有细胞膜（图1-1）。

（2）蟾蜍血涂片的制备与观察：取一滴蟾蜍血液，靠近一端滴在载玻片上，将另一载玻片的一端呈45°角紧贴在血滴的前缘，均匀用力向前推，使血液在载玻片上形成均匀的薄层（图1-2）。晾干。将制备好的蟾蜍血涂片在低倍镜下选择涂布均匀的血细胞，换高倍镜观察。蟾蜍的红细胞呈椭圆形，有核，细胞膜不显著。白细胞数目少，为圆形。此外，还看到各种形态不同的血小板（图1-3）。

（3）人血细胞的观察：取人血涂片1张，在显微镜下观察，可见人红细胞为凹圆盘形，无核。白细胞数目少，为圆形。

（4）制备蟾蜍脊髓压片观察脊髓前角运动神经细胞：取一只蟾蜍，左手握住其股部，腹部贴着掌心，食指压住蟾蜍头部前端使其尽量屈腹。在头和躯干之间可摸到一凹陷处（枕骨大孔），用解剖针从枕骨大孔向内刺入1～2mm（注意不要太深），随即将针尖向前搅碎脑组织，然后再转向后深入椎孔内，搅碎脊髓，待看到蟾蜍后肢强直肌肉松弛时为止。在口裂处剪去头部，除去延脑，剪开椎管，可见乳白色脊髓，取下脊髓放在平皿内，用Ringer液洗去血液后放在载玻片上，剪碎。将另一载玻片压在脊髓碎块上，用力挤压。将上面的载玻片取下即可得到压片。在压片上滴一滴甲苯胺蓝染液，染色10min，盖上盖玻片，吸去多余染液。在显微镜下观察，染色较深的小细胞是神经胶质细胞。染成蓝紫色的、大的、有多个突起的细胞是脊髓前角运动神经细胞，胞体呈三角形或星形，中央有一圆形细胞核，内有一个核仁（图1-4）。

（5）骨骼肌细胞的观察：取家兔骨骼肌纵切片，置于低倍镜下观察，可见细胞呈圆柱形，其内有许多细胞核（图1-5）。

（二）显微测微尺的使用

1.原理

显微测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成，两尺配合使用。目镜测微尺，简称目微尺，是一块圆形的玻璃片，直径20～21mm。它的上面刻有直线或网格式的标尺。其中网格式的目微尺可用来测量物体的体积。使用目微尺时，先将目镜从镜筒中抽出，旋去接目透镜，然后将目微尺放在目镜的光阑上。注意让有刻度的一面朝下，再将接目透镜旋上，把目镜插入镜筒 ，即可进行测量。

镜台测微尺，简称台微尺，是一块特制的载玻片。它的中央封着一把刻度标尺，全长1mm，共划分成10个大格，每一个大格又分成10个小格，共100个小格，每一小格长0.01mm，即10μm。在标尺的外围有一小黑环，利于找到标尺的位置。要测量标本的长度，首先必须对目微尺在不同放大倍数的物镜下进行标定。

2.方法

（1）将台微尺夹于载物台上，调焦直至看到台微尺刻度。这时目微尺和台微尺同时显示在视野中，转动目镜，使目微尺标尺直线与台微尺标尺直线尽量靠近平行，最终促使两线重合，再移动台微尺，使两个微尺左边一端平齐，然后从左到右找出两个微尺另一次重合的直线（图1-6），分别计数重合线之间台微尺和目微尺各自包含的格数，据公式即可计算出目微尺每个小格的标度。

（2）按下式求出目镜测微尺每格代表的长度。

这样，就可进行测定。测定时，取下台微尺，换上标本，记录被检标本占目微尺的格数，然后乘以每小格代表的长度，即为标本的实际长度。如果更换不同放大率的镜头，必须重新标定目微尺，这样才能再次测量。

根据测量结果可计算各种细胞、细胞核的体积及核质比例，公式如下：

1）椭圆形：计算式为V=4/3πab2（a、b为长、短半径）。

2）圆球形：计算式为V=4/3πR3（R为半径）。

3）核质比例：计算式为Np=Vn/（Vc-Vn）（Vc为细胞的体积，Vn为细胞核的体积）。

（三）测量人口腔黏膜上皮细胞

从显微镜载物台上取下镜台测微尺，换上人口腔黏膜上皮细胞标本，测量细胞、细胞核的长短径。