三、实验内容

（一）蟾蜍胸骨剑突软骨细胞液泡系活体染色及观察

1.原理

在动物细胞内，凡是由单层膜包裹的小泡都属于液泡系，包括内质网、高尔基复合体、溶酶体、过氧化物酶体、转运泡、吞噬泡等。软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体，能合成与分泌软骨黏蛋白及胶原纤维等，因而液泡系发达。中性红是液泡系的专一性活体染色剂，在细胞处于生活状态时，只将液泡系染成红色，细胞质和细胞核不被染色，中性红染色可能与液泡系中的蛋白质有关。

2.方法

取1只蟾蜍，破坏脑和脊髓，剪开胸腔，取胸骨剑突软骨最薄部分的一小片，置于载玻片上，滴加1/3000中性红染液，染色10～15min，用吸水纸吸去染液，加1滴Ringer液，盖上盖玻片，吸去多余Ringer液，镜下观察。

3.结果

显微镜下观察，可见软骨细胞为椭圆形，细胞核周围有许多染成玫瑰红色、大小不一的小泡，即为软骨细胞液泡系（图3-1）。

图3-1　蟾蜍胸骨剑突软骨细胞中液泡系的显示

（二）大白鼠胫骺软骨细胞电镜照片的观察

动物细胞液泡很小，即使是活体染色也只能看出是1个小点，为了进一步看清液泡的结构，我们有必要观察软骨细胞的电镜照片。

大白鼠胫骺骨细胞电镜照片，细胞核与核仁很清楚，细胞质中有丰富的粗面内质网，液泡系发达，液泡由单层膜包围，细胞周边有液泡释放。（图3-2、图3-3、图3-4）

图3-2　电镜下的粗面内质网

图3-3　电镜下的滑面内质网

图3-4　电镜下的溶酶体