第二节　工艺及制剂研究

血栓心脉宁片是在原有血栓心脉宁胶囊的基础上改变剂型而来，因血栓心脉宁胶囊是将川芎、丹参、毛冬青以60%醇提的浸膏粉与槐花提取物、人参茎叶总皂苷及其他药材的原粉混合后制成胶囊，故单次服用剂量大。

在本研究中，我们首先检索处方中各味中药的化学成分、药理作用方面的文献；根据药物所含主要药效活性成分的组成及理化性质，确定了川芎提取挥发油后水提，丹参、毛冬青先醇提后水提，水蛭水提，其他以原粉入药，混合后加辅料制成制剂的工艺路线。

以出膏率、丹参酮ⅡA含量、阿魏酸含量为指标，对乙醇浓度、提取溶剂量、提取时间、提取次数等生产条件，设计正交试验进行考察，优选出最佳提取条件。经连续3批中试样品观察，对血栓心脉宁片的硬度、崩解度、有效成分含量等进行了测定，符合《中国药典》片剂项下的各项规定。

一、脂溶性成分——醇提取条件的确立

方中丹参、毛冬青主要含有醇溶性成分如丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、毛冬青苷甲等，故工艺上宜采用乙醇提取的方法。为了系统考察醇提工艺参数，我们设计了三水平四因素正交试验，取丹参250g，毛冬青125g，各9份，按L9（34）试验列号各条件提取，合并滤液，回收乙醇，按本品标准中丹参酮ⅡA的含量测定方法操作，以此为指标确定乙醇提取条件。因素水平设计见表3-1，测定结果见表3-2、表3-3。

由上可知，以丹参酮ⅡA含量为考察指标时，最佳提取工艺条件为：A3B3C1D3，并且RA＞RC＞RD＞RB，因D为次要因素，D2与D3相差甚小，综合考虑工时而采用D2，即最佳工艺为：丹参、毛冬青以80%乙醇回流提取2次，每次2h，加醇量为生药量的7倍。按此工艺操作，测定醇提干膏收率，平均收率为13.07%（表3-4）。

本试验醇提取得干膏比较稳定，考虑到生产时可能会有波动，故醇提干膏收率在12.00%~14.00%均为合格。

二、挥发性成分——挥发油提取条件的考察

方中川芎含有大量挥发性成分，为了在产品中尽量保存药效成分，单独提取川芎中的挥发油。取川芎500g，3份，分别加6倍量水，采用水蒸气法提取挥发油，考察提取时间与挥发油收率之间的关系（表3-5）。

由表3-5可知，提取时间在4h以上，可使挥发油基本提取出来，综合考虑得率与时间因素，将挥发油提取时间定为4h。

三、水溶性成分——水煎煮条件的确定

方中丹参含有丹酚酸类成分；毛冬青含有鞣质、糖类；水蛭含有水蛭素、肝素等，这些成分均为水溶性成分，故丹参、毛冬青醇提后的药渣连同川芎、水蛭宜采用水煎煮法进行提取。以上四味，由于丹参已经过二次醇水溶液提取，相关成分不宜作为水提时含量测定项目考虑；川芎中的水溶性代表性成分阿魏酸含量较高，且药效活性明确，因此本研究采用正交试验，以阿魏酸含量为考察指标，来确定水煎煮的提取条件。

取醇提后药渣及方中川芎、水蛭，9份，按L9（34）试验列号条件煎煮，合并滤液，浓缩并干燥得干浸膏，精密称取一定量浸膏，加水10ml使溶解，用乙酸乙酯萃取4次（每次20ml），合并上层，继而用5%碳酸氢钠溶液萃取4次（每次20ml），合并碱液，滴加盐酸调pH值至2~3，再用乙酸乙酯萃取4次（每次20ml），合并上层，蒸干，残渣用甲醇溶解并定量转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。以阿魏酸为对照品（1mg/ml），以苯-甲醇-冰乙酸（30∶3∶1）为展开剂，按薄层扫描法（λs=322nm，λR=260nm，SX=3）进行测定，并计算供试品中的阿魏酸含量。因素水平设计见表3-6，测定结果见表3-7，方差分析见表3-8。

由表3-8可知，最佳工艺为A1B1C3，且RA＞RC＞RB，因C不是主要因素，且C2、C3相差较小，为节省工时，而采用C2，即最佳工艺为煎煮2次，每次2h，加水量为生药量的8倍。以此工艺，按表3-9投料进行水煎煮，得到平均水提得干膏率为14.61%。

本实验水煎煮提取得干膏收率较平稳，考虑到生产时会有一定波动，所以拟定水煎煮提取浸膏得干粉率13.50%~16.00%均合格。

四、直接粉碎部分

方中麝香、冰片、牛黄、人参茎叶总皂苷、蟾酥因其用量少，且均为贵重药材，故采用粉碎直接入药（表3-10），以免损失，从而确保药效。

五、辅料用量的实验研究

在压片时为了保证片重均匀、崩解时限合格，加入压片常用的辅料：滑石粉、硬脂酸镁及羧甲淀粉钠，并对其用量进行了实验研究，结果见表3-11。

结论：取辅料滑石粉、硬脂酸镁、羧甲淀粉钠，按5.0∶0.3∶15比例加入相当药粉量的6.8%~15.0%，均可压出质量合格的片剂。

六、制法与工艺流程

【处方】

川芎　丹参　槐花　毛冬青　水蛭

麝香　冰片　牛黄　人参茎叶总皂苷　蟾酥

【制法】

以上10味，麝香、冰片、牛黄、人参茎叶总皂苷、蟾酥粉碎成细粉；丹参、毛冬青用80%乙醇回流提取2次，每次2h，加醇量为生药量的7倍，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.20~1.30（60℃测）的稠膏，药渣备用；川芎加6倍量水提取挥发油，收集挥发油，蒸馏后水溶液另器收集，药渣备用；水蛭与醇提药渣合并加8倍量水，煎煮2h，滤过，滤液放置，药渣与上述川芎药渣混合，加8倍量水，煎煮2h，滤过，滤液与上述各煎液合并，浓缩至相对密度1.20~1.30（60℃测）稠膏时，与醇提取膏混合，减压干燥，粉碎成细粉；槐花加6倍量水，用饱和碳酸钙水溶液调pH值8~9，加热至微沸，保温40min，趁热滤过，药渣如上法再提取2次，合并滤液，在60~70℃，搅拌加入浓盐酸，调pH值4~5，静置11~12h，抽滤上清液，沉淀用适量水洗3~4次，减压干燥，粉成细粉，与上述各细粉混匀，制成颗粒，干燥，加入适量滑石粉、硬脂酸镁、羧甲淀粉钠，并喷加川芎挥发油，混匀，压制成1 000片，包薄膜衣，即得（图3-1）。

七、中试产品考察结果

按处方量扩大10倍，依照制法项下操作，制备3批血栓心脉宁片，并对醇提得膏收率、挥发油得量、水提得膏收率、粉碎出粉率、槐花提取物得量、辅料量、成品率、含量进行测试（表3-12）。