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三、聚合酶链反应
聚合酶链反应(PCR)是最常用的分子生物学技术之一,通过变性、退火和延伸的循环来完成核酸分子的大量扩增。由于肿瘤是一种多基因、多阶段、多因素参与的疾病,且它的发生一般表现为原癌基因激活、抑癌基因抑制、DNA修复基因失活等。利用PCR联合其他一些技术,如聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR restricition fragment length polymorphism,PCR-RFLP)可检测有无基因突变,以及寻找基因突变位点,为肿瘤靶向治疗提供理论依据。近年来,数字PCR技术正在兴起,它可用于极微量核酸样本及稀有突变位点的检测,尤其适用于肿瘤治疗过程中的动态监测。它具有灵敏度高、可定量分析的优势,可用于肿瘤的诊断、治疗干预、药物疗效评价、肿瘤复发转移预测等。PCR技术往往不会单独应用,一般会联合其他生物学技术如基因芯片、印记杂交等,将筛选出的目标基因进行PCR扩增,进行进一步研究。