诱导痰是一种客观反映气道炎症状态的无创检测方法，因其安全性、有效性和可重复，故在呼吸系统疾病研究中广泛应用，尤其是对哮喘、慢性咳嗽等嗜酸性粒细胞性气道炎症疾病。

高渗盐水雾化产生痰液分泌的具体机制不明确，但考虑主要原因可能与其改变气道腔内局部渗透压，使黏膜下水分向气道腔内流动有关。此外，高渗盐水还能在一定程度上增加纤毛清除率。

目前国际上最常用的是改良的Pin法，在国内，中华医学会呼吸病学分会哮喘学组发布的《咳嗽的诊断与治疗指南（2015）》中也制定了高渗盐水雾化诱导痰炎症细胞检测方法，方法如下：

高渗盐水，0.1%二硫苏糖醇（DTT）及苏木精-伊红（HE）或瑞士染色液等。

超声或压缩雾化器、水浴箱、旋涡或水平振荡器、光学显微镜等。

①诱导前10分钟让患者吸入沙丁胺醇400μg；②10分钟后清水漱口、擤鼻；③3%高渗盐水雾化吸入10分钟，漱口、擤鼻后主动用力咳痰至培养皿；④若患者无痰或痰量不足则重复步骤“③”，直至咳出足够量合格痰标本或雾化总时间达30分钟时均终止雾化。

①诱导前10分钟让患者吸入沙丁胺醇400μg；②10分钟后清水漱口、擤鼻；③3%高渗盐水雾化吸入15分钟，漱口、擤鼻后主动用力咳痰至培养皿；④若患者无痰或痰量不足则换用4%高渗盐水继续雾化8分钟；⑤若患者无痰或痰量不足则换用5%高渗盐水继续雾化7分钟后终止诱导程序；⑥雾化期间如患者咳出足量合格痰标本或雾化总时间达30分钟时均需终止雾化。

痰液咳出后应立即处理，4℃存放不超过3小时。及时用镊子收集痰栓或不透明痰块，加入2～4倍体积的0.1%的DTT充分混合，裂解10～15分钟，37℃水浴和水平温和振荡可提高裂解效果，48μm滤纸或300目尼龙滤网过滤后，常温离心10分钟（2 500r/min），弃上清液后磷酸盐缓冲液（PBS）重悬沉淀细胞，用牛鲍氏计数板计数细胞总数，细胞悬液涂片，经HE染色或瑞氏染色，光镜下对400个以上炎症细胞进行分类。

诱导痰标本是否来自下气道、痰标本是否合格主要通过诱导痰的细胞学检查来判断。目前常用的标准是：每低倍镜视野下痰标本的白细胞数>25个、鳞状上皮细胞<10个；或者吉姆萨染色后每张涂片计数400个细胞，其中鳞状上皮细胞<20%且细胞存活率>50%为合格标本。

1.实验前检测肺功能，第1秒用力呼气容积（FEV ₁）占预计值<80%的患者可以提前半小时吸入沙丁胺醇，并且采用梯度浓度法进行诱导痰检测。

2.重症哮喘或哮喘急性发作患者需联合肺功能及临床症状综合判断是否适合进行高渗盐水雾化。当患者FEV ₁占预计值<60%或喘息症状明显时建议让患者自然咳痰或行生理盐水雾化诱导。

3.实验室须备有哮喘急性发作等不良反应的抢救指引、设备和药物，雾化过程中密切观察患者表现，必要时监测肺功能。

4.激素类、抗过敏药、茶碱等药物可能会对检查结果造成影响，需要停药3天以上，但在观察治疗随访效果时，检查期间可不停药。

5.应该避免48小时内重复诱导痰检测。

健康受试者诱导痰细胞成分主要是巨噬细胞（60%左右）和中性粒细胞（30%左右），而国内参考值中性粒细胞比例略高；吸烟者中性粒细胞比例稍有增高，嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、支气管上皮细胞数量较少。与自然痰相比，诱导痰白细胞总数和其中的单核细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的绝对计数显著增加，但是细胞分类计数无差别。

儿童诱导痰细胞分类正常参考值以巨噬细胞（76%左右）和中性粒细胞（21%左右）为主。而嗜酸性粒细胞约0.4%，与成人相近。

近年，有学者提出将哮喘分为嗜酸细胞性哮喘（eosinophilic asthma，EA）和非嗜酸细胞性哮喘（non eosinophilic asthma，NEA）2个亚型，前者呼吸道局部以嗜酸细胞炎性反应为主，后者呼吸道局部则以非嗜酸细胞炎性反应为主。

国内正常人诱导痰嗜酸性粒细胞比例<2.5%，因此多采用痰液嗜酸性粒细胞占所有非鳞状细胞总数≥3%区分EA和NEA，同时以痰液中性粒细胞百分比≥61%作为中性粒细胞升高的标准。哮喘患者，痰嗜酸性粒细胞是预测激素治疗反应的独立危险因素之一，嗜酸性粒细胞比值不高则提示激素治疗反应性差。

在NEA部分患者痰中性粒细胞增多，并进一步发现经糖皮质激素治疗后中性粒细胞无显著变化，而且重度哮喘患者明显高于轻、中度哮喘患者。部分研究发现中性粒细胞与FEV ₁呈负相关，对于此类患者可以试验应用大环内酯类抗生素和磷酸二酯酶抑制剂。

诱导痰细胞学检查是咳嗽病因诊断最重要的一种无创检查方法。诱导痰嗜酸性粒细胞增高是诊断嗜酸性粒细胞性支气管炎（eosinophilic bronchitis，EB）的主要指标，亦可用于咳嗽变异性哮喘的辅助诊断，并且有助于指导吸入性糖皮质激素应用。

EB是慢性咳嗽的常见病因，当肺通气功能正常、无气道高反应性、呼气峰流速平均周变异率正常时，痰细胞学检查嗜酸性粒细胞比例>2.5%需要考虑此病诊断。

研究发现，部分慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）患者急性加重期痰液中嗜酸性粒细胞增加，高达40%慢阻肺受试者痰中嗜酸性粒细胞>3%。证据表明，痰嗜酸性粒细胞的增多可以预测吸入糖皮质激素疗效较好。

［1］Pin I，Gibson PG，Kolendowicz R，et al. Use of induced sputum cell counts to investigate airway inflammation in asthma［J］.Thorax，1992，47（1）：25-29.

［2］Pavord ID，Pizzichini MM，Pizzichini E，et al. The use of induced sputum to investigate airway inflammation［J］. Thorax，1997，52（6）：498-501.

［3］中华医学会呼吸病学分会哮喘学组. 咳嗽的诊断与治疗指南（2015）［J］. 中华结核和呼吸杂志，2016，39（5）：323-354.