第一篇
医学微生物学基本实验技术

实验一　显微镜油镜的使用和保护

【实验目的】

熟悉显微镜的使用方法。

【实验材料】

标本、载坡片、显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸等。

【实验原理】

使用油镜时，需在载玻片上滴加香柏油。这是因为油镜的放大倍数较高，而透镜很小，光线通过不同密度的介质（载玻片→空气→透镜）时，部分光线会发生折射而散失，进入镜筒的光线少，视野较暗，物体观察不清。若在透镜和载玻片之间滴加与载玻片折光率（n=1.52）相仿的香柏油折光率（n=1.515），则使进入油镜的光线增多，视野亮度增强，物像清晰（图1-1）。

【使用方法】

1. 使用前必须对所用显微镜进行详细检查，若发现问题应及时报告老师。

2. 调光：检查未染色标本时，以弱光线为宜，此时可将集光器下降或缩小光栅，检查染色标本时，以强光线为宜，此时应将集光器升到最高位置，将光圈完全打开。

3. 标本观察：将标本置于载物台上，用弹簧夹或标本推进器固定，将待检标本移于物镜下。先用低倍镜找出标本的位置，然后提高镜筒，在标本欲检部位滴1滴香柏油，然后转换成油镜。从旁边观察，调节粗螺旋，使镜头浸入香柏油中至接近玻片时为止（注意勿压碎玻片）。通过目镜观察，调节粗螺旋提升镜筒，至看到模糊物像时，再调节细螺旋，至可清晰看到标本为止（如果油镜末端已离开油面，应按上述过程重复操作）。观察标本时应双眼同时睁开，以减少眼睛疲劳。最好用左眼观察，右眼配合绘图和记录。观察完毕，应先提高镜筒，并将高倍镜（或油镜）头转向一侧，再取下玻片。

4. 显微镜使用完毕后，用擦镜纸擦拭油镜头，不可用粗布或硬纸擦拭；向下调节聚光镜，反光镜直放，物镜头成八字形摆放；套好镜罩，按指定地点放好。

5. 显微镜的保护要点：

（1）显微镜是精密仪器，注意爱护，取送搬移时，要一手握紧镜臂，一手托住镜座，轻拿轻放，以免碰撞，严格按规程操作。

（2）物镜和目镜只能用擦镜纸擦拭，不能用手、手绢、餐巾纸等擦拭，每次使用完油镜，应立即用擦镜纸将油镜上的油擦干净，若油已干或镜头模糊不清，可用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭，并用另一张擦镜纸擦净残留的二甲苯。

（3）不能用错物镜，切片观察时不能放反，使用高倍镜时应先用低倍镜观察后再转换成高倍镜观察。

（4）细螺旋是显微镜最精细而脆弱的部分，只能做轻微的来回转动。显微镜各部位应保持清洁，避免日光直接照射，避免与强酸、强碱等化学物质接触。

（5）显微镜不用时，必须将物镜转成“品”字形，降下聚光器，罩上防尘套，置于干燥处，以防受潮。

【思考题】

1. 如何识别普通光学显微镜的油镜头？怎样正确使用油镜？

2. 油镜的原理是什么？为什么要选用香柏油作为镜油？