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六、 注射后标本的处理
标本注射后,用煤酚皂溶液洗净外渗和污染部分,并用流水冲洗,然后以10%甲醛溶液固定1周,根据观察的目的可作以下不同的处理。
(一) 标本的解剖
为观察肢体的浅、深淋巴管和淋巴结,以及内脏的器官外淋巴管和淋巴结,可用肉眼或借助解剖显微镜进行解剖。淋巴管的管腔细小,管壁菲薄,肢体浅淋巴管多藏于皮下脂肪之中,深淋巴管则伴血管和神经走行,并被结缔组织所包绕。因此,在剖查淋巴管时,必须十分细致耐心,一般是用尖细的刀、镊子和分离针等精细工具,进行钝性剥离。先找出显色淋巴管的起点,然后沿其走行方向,除去周围的结缔组织和脂肪,暴露出显色的淋巴管,尽力使淋巴管保持完整的形态和正常的位置(图3-1,2)。注射后的标本也可立即进行解剖,然后再用甲醛溶液固定。未经固定的标本的淋巴管显色明显,组织比较疏松,易于解剖操作,但如果损伤了淋巴管,则注射剂外渗而污染周围组织。
(二) 铺片透明标本
为研究器官内淋巴管的配布,可做淋巴管铺片透明标本。在中空性器官(例如胃、肠),可按层分离成黏膜层和肌层,或肌层和浆膜层的薄片,并切成3~4cm 2小块,用丝线固定于载玻片上。胎儿和小儿的某些中空性器官(如喉、直肠、膀胱),因形体较小,所以可将其纵行切开,然后整个器官固定于一个载玻片上,以便观察整个器官淋巴管的配布情况。实质性器官切成厚0.2~0.5cm的薄片(3~4cm 2)。用流水冲洗24小时后,再用各级酒精(50%、70%、80%、90%、95%、100%)脱水,每级放置3天。然后置于冬青油内透明,2~3日内即可见到清晰、美观的淋巴管透明标本(图3-4,5),放入合碟内,用双目立体放大镜或在解剖显微镜下观察器官内淋巴管的构筑及其相互间的联系。
图3-4 人盲肠的淋巴管(淋巴管注射铺片透明× 40)
1.黏膜层毛细淋巴管;2.黏膜下层毛细淋巴管;3.黏膜下层淋巴管
图3-5 人盲肠黏膜下层淋巴管(淋巴管注射铺片透明× 122)
1.淋巴管狭窄处;2.淋巴管膨大处
(三) 连续切片,苏木素、伊红染色
选注射较好的部位取材,用火棉胶或石蜡包埋,切成厚10~30μm的连续切片,苏木素、伊红染色。切片标本可显示毛细淋巴管和淋巴管的层次关系(图3-6),所以可配合铺片透明标本系统地观察器官内淋巴管的构筑。
图3-6 人结肠浆膜下层淋巴管(淋巴管注射组织切片× 66)
1.毛细淋巴管;2.淋巴管;3.小动脉;4.小静脉