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二、 POCT常用的分析技术
(一)干化学测定
干化学测定包括尿液分析试条和血液干化学分析,已在临床检验中普遍采用。血液干化学测定仪可测胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、ALT、AST、胆红素、肌酸激酶、尿素、肌酐、尿酸和淀粉酶等。
(二)免疫测定 1.斑点金免疫渗滤试验(Dot Immunogold Filtration Assay,DIGFA)
是将抗体滴加在具有过滤性能的固相载体硝酸纤维素薄膜上,作为固相载体,依次在膜上滴加标本、免疫金及洗涤液等试剂,使其与硝酸纤膜上的抗体或抗原发生反应,形成大分子胶体金复合物,阳性结果在膜上呈现红色斑点。
2.免疫层析试验(Immune Chromate Graphic Assay,ICGA)
利用了微孔膜的毛细血管作用,使板条一端的液体如层析一般向另一端渗移,同时与其板条上的抗体结合。可测感染性疾病、心脏疾病、肿瘤和癌症等疾病的标志物。主要的方法包括免疫荧光法和金标法,一般来说,前者的灵敏度高于后者。
3.生物传感器技术
新一代POCT仪器使用生物传感器,利用离子选择电极,底物特异性电极,电导传感器等特定的生物检测器,组合了酶化学、免疫化学、电化学与计算机技术的结合,通过抗体捕获抗原后改变折光方式和反射光的颜色的原理的一种新的生物技术。
4.生物芯片技术
生物芯片是最新发展的新技术,其特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目。目前可分基因芯片、蛋白质芯片和细胞芯片。它们具有高灵敏度、分析时间短等优点。目前国内正在研发用于测定肿瘤标志,肝炎标志和心肌标志等,生物芯片系统。不久将来芯片式的POCT仪将逐步应用到各个医学领域。
5.多技术的综合应用
图2-4-2 美国Biosite公司的Triage
近年来,更多的、更先进的技术应用于POCT检测,综合了免疫荧光、微激光、微校准和集成芯片技术为一体的POCT设备问世。其中,在心血管领域具有典型代表意义的是美国Biosite公司的Triage(如图2-4-2)快速心肌梗死/心力衰竭诊断仪,Triage诊断仪综合采用了以上多项技术,可以在15分钟内得到BNP、cTnI多项心脏标志物的结果。