四、羊体寄生虫检查法
羊体寄生虫病种类很多,但只有少数重症病羊临床症状表现比较明显。羊体的寄生虫病生前诊断往往需实验室检验。粪便检查是患羊寄生虫病诊断的一个重要手段。寄生虫病检查一般采取刚刚排出的粪便在实验室进行镜检。常用的检验方法有以下几种。
1.虫卵检查法
(1)直接涂片法 在洁净无油污的载玻片上滴1~2滴无菌清水,用小木棒蘸取少量被检羊的粪便放在玻片上与水混合,涂匀后将粗渣推到一端,涂片厚薄要适当,盖上盖玻片,置于低倍显微镜下观察虫卵。用此法检查虫卵操作简便省时,所需设备简单。缺点是检出率低,需要几个标本。
(2)饱和食盐水漂浮法 取被检羊粪10克,加少量饱和食盐溶液,用小木棒将粪球充分捣碎,再加10倍量的饱和食盐溶液搅匀,以孔径0.25毫米的铜筛过滤,静置30分钟,用直径5~10毫米的铁丝圈与液面平行接触,蘸取表面含有虫卵的液膜,抖落于载玻片上并覆盖玻片,置于显微镜下检查。用此法简单,可检查出多种线虫卵和一些涤虫卵,效果良好。但对比重大的虫卵效果不好。
(3)水洗沉淀法 取被检羊粪5~10克,放在200毫升容量的烧杯内,加入10倍清水,用小木棒将粪球充分捣碎,再加5倍量的清水调成糊状,用孔径0.25毫米的铜筛过滤或用2层纱布过滤,去掉粪渣。然后向滤液容器中加满清水,静置15分钟,弃去上层液,再加清水,保留沉淀物,如此反复3~4次,直至上层清澈为止,弃去上清液后用吸管吸取少量沉淀物涂于载玻片上,置于低倍显微镜下观察。此法适用于检查虫卵比重大的羊吸虫病。
2.虫体检查法
(1)蠕虫成体检查法 取被检羊粪数克盛于盆内,加入大约10倍生理盐水搅拌均匀,静置沉淀20分钟弃去上清液,再于沉淀物中重新加入生理盐水,如此反复2~3次,最后取少量沉渣置于黑色背景上,用放大镜寻找虫体。如粪中混有绦虫节片,可直接用肉眼观察新排出的粪便,可见似米粒样的白色孕卵节片。
(2)蠕虫幼虫检查法 取被检羊新鲜粪球3~10粒,放入平皿内加入适量40℃温水,10~15分钟后取出粪球;将留下的液体放在低倍显微镜下检查有无幼虫。
(3)螨检查法 先剪毛,去掉羊体患部的干硬痂皮,然后用锐利刀片在患部和健部交界处刮取一些皮屑,其深度以局部微微出血为度,把采取的病料放入烧杯内,加入适量10%的氢氧化钾溶液,置于酒精灯上微微加温,20分钟后置于室温下过夜,待皮屑溶解后取沉渣涂片镜检。也可取少量病料直接放于载玻片上,然后滴加50%甘油生理盐水2~3滴,盖上盖玻片镜检。用此法进行虫体检查操作简便,但检虫率低,需要多取几次样品检查。