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第五节 去白细胞血液制备
在血液制备时去除白细胞能有效阻止绝大多数白细胞在输血时进入受血者体内，可显著降低FNHTR和HLA同种免疫的发生率，显著减少输血CMV及相关病毒的传播，从而显著降低输血风险。
去除血液成分中的白细胞有多种方法。主要产品有去白细胞全血、去白细胞红细胞和去细胞血小板。根据《血站技术操作规程（2012版）》的要求，应当使用白细胞过滤技术在采血后2天内（采血次日为第1天）完成白细胞过滤。
一、去白细胞全血制备
在三联或四联塑料血袋管路上配置过滤器，根据白细胞过滤器生产厂家说明书的要求进行过滤操作，在血液成分制备时将白细胞滤除。
（一）联袋滤器式（过滤法）去白细胞全血制备的原理
血液通过连接好的白细胞过滤器，依靠重力作用自然过滤白细胞。现在的滤器利用滤过和吸附技术能滤除血液中99. 99%的白细胞。此方法不打开原血袋的封闭系统，无菌、无热原、安全、有效、是目前采供血机构常用的去除血液中白细胞的制备技术。
（二）所需材料和设备要求
采集在一次性去白细胞滤器联袋的全血，应当在采血后2天内过滤。预先开启恒温过滤柜、热合器。
（三）去白细胞程序
1.接收原料全血，检查一次性去白细胞过滤器联袋滤器完好，血袋无破漏，在有效期内；扫描献血码录入信息。
2.将全血轻轻摇匀后垂直倒挂在经过预冷［温度（4±2）℃］的恒温过滤柜上，关闭旁路夹子，折断母袋上的阻塞件，血液在自身重力作用下自然过滤，调节流速（80～120滴/分），以避免红细胞溶血；血液自动经白细胞滤器向下流入转移血袋中。
3.过滤完毕，将转移血袋中的空气排除。
4.热合 按《热合器操作规程》热合转移血袋充满血液的导管血样辫三段（第一段距转移血袋最少20cm，其余两段各长15～20cm），或将采血时已热合的原血袋三段导管血样辫转移到转移血袋上用松紧带捆绑牢固。
5.若过滤全血过程中，白细胞滤器堵塞，则开放旁路夹子，让血液从旁路流入转移血袋，血液按未去白细胞处理。
6.如果在进行白细胞过滤操作前，血液已经处于保存温度（4±2）℃，需要在室温进行过滤时，室温应≤26℃，而且应当尽快放回至既定保存温度的环境中，从取出到放回的时间应＜3小时。
7.按《医疗废物管理程序》处理医疗废物。
8.信息录入。
9.血液交接。
二、去白细胞红细胞制备
血液成分中白细胞的去除方法较多，其效果各异。目前去除红细胞制品中白细胞的方法有过滤法、离心去白膜法、冰冻融化法、洗涤法等。
（一）联袋滤器式（过滤法）去白红细胞制备
1.原理 血液通过连接好的白细胞过滤器，依靠重力作用自然过滤，滤除血液中的白细胞，是目前采供血机构常用的去除红细胞中白细胞的制备技术。
2.所需材料和设备 采集在一次性去白细胞滤器联袋的全血，应当在采血后48小时内过滤。恒温过滤柜、封管热合器。
3.准备工作 各种仪器处于正常状态。一次性去白细胞过滤器联袋滤器完好，血袋无破漏，在有效期内。
4.将全血轻轻摇匀后垂直倒挂在经过预冷［温度（4±2）℃］的恒温过滤柜上，关闭旁路夹子，折断母袋上的阻塞件，血液在自身重力作用下自然过滤，调节流速（80～120滴/分），以避免红细胞溶血；血液自动经白细胞滤器向下流入转移袋中。
5.过滤完毕，将转移袋中的空气排除，按《热合器操作规程》热合；按《医疗废物管理程序》处理污物。
6.将配血导管血样辫转移到转移袋上用松紧带捆绑牢固。
7.按本节《悬浮红细胞制备》操作即获得去白红细胞。
（二）其他去白细胞红细胞的制备方法
1.离心去白膜法
依据红细胞与白细胞比重不同而分离、去除白细胞，是简单、经济易于操作的制备少白细胞的方法。
在全封闭的多联塑料血袋内通过二次离心去除全血中的白细胞，制成少白细胞红细胞。具体做法是：第一次重离心分离出红细胞和血浆，含白细胞和血小板的白膜层经再次轻离心，分离出血小板，剩余的则为白细胞，弃去。该法可去除红细胞制剂中65%～85%的白细胞，红细胞回收率83%～92%。
2.冰冻融化法
将红细胞从全血中分离出来，加入甘油作为冷冻保护剂，然后置于低温下冷冻保存。需要使用时复温、融化并通过洗涤的方法去除甘油。在反复洗涤过程中可去除绝大多数白细胞，白细胞去除率可达90%～98%（具体操作详见本章第二节红细胞制备：冰冻红细胞制备及解冻）。目前该法主要用于制备稀有血型的红细胞。
3.洗涤法
用无菌生理盐水将红细胞洗涤3～6次（常规洗涤3次），最后用生理盐水悬浮红细胞，制成的洗涤红细胞用于有临床适应证的患者；由于反复洗涤不仅去除了98%以上的血浆蛋白，也去除了80%以上的白细胞（具体操作方法详见本章第二节红细胞制备：洗涤红细胞制备）。
三、去白细胞血小板制备
血小板输注无效的主要原因是患者体内产生了HLA抗体。HLA抗体的产生很少由血小板本身引起，多数是由浓缩血小板中污染的白细胞所致，输注去除白细胞的血小板，是减少血小板输注无效的输血治疗方法。
（一）白细胞滤器过滤法
专用于滤除血小板中白细胞的白细胞滤器具有操作简便、白细胞滤除率高、血小板回收率高等优点，是一种比较理想的去除血小板中白细胞的方法。
1.将一次性白细胞滤器与血小板袋无菌接合，轻轻摇动血小板袋使其混匀，垂直倒挂在（22±2）℃的恒温过滤柜上使过滤器自然下垂，关闭旁路夹子，打开过滤器上方止流夹，血小板在自身重力作用下自然过滤，调节流速使血小板在15～20分钟全部流入转移袋中。
2.关闭夹子，取下血袋，热合断开。
3.录入信息，成品交库。
（二）离心法去除浓缩血小板中的白细胞
1.单一单位离心法
（1）用四联袋以PRP法制备的浓缩血小板（2U全血制备1袋浓缩血小板）收集于第3袋中，携同第4（空）袋，放于振荡器上保存，待其完全解聚。
（2）于（22±2）℃以离心力450g离心10分钟，沉淀血小板中污染的白细胞和红细胞。
（3）将第3袋内上清血小板悬液倾入第4袋内，热合封闭袋间的塑料管，少白细胞的血小板位于第4袋内。
2.多个单位浓缩血小板混合离心法（Schiffer）
采用特制的下端有一凸出2ml容量的小袋的转移袋，将4袋解聚后的血小板转移入特制的转移袋中。以390g的离心力离心10分钟，分出上层悬液即为少白细胞血小板。
（三）血细胞分离机采集采血小板
目前的血细胞分离机如Trima、Amicus等采用了涡旋减少白细胞的方法去除白细胞。有的血细胞分离机（如MCS +）也于最近在血小板收集管路安装了白细胞过滤器，获得去白细胞血小板。