血站技术手册
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第三节 成分血采集

随着输血医学及相关科学技术的发展,血液的采集已不限于只采集全血,已能进行多种细胞成分和血浆的采集。常见的是用血细胞分离机(automated blood collection system或separator system)采集血小板、血浆、白细胞、红细胞和造血干细胞等。
血细胞分离机基本工作原理大同小异,即通过特制的封闭管路设施,使献血者的部分全血通过血细胞分离机进行体外循环,从献血者的全血中提取相应的血液成分,再将剩余血液成分回输给献血者的闭环过程。由于采用的是全封闭式一次性管路,同时提取的血细胞量也有严格的控制,对于献血者来说是安全的。
一、成分血采集的准备和基本程序
任何一种成分血采集,不管使用的是哪一种品牌型号的血细胞分离机,医务工作人员必须接受相关知识及操作培训并取得相应资格,熟练掌握采血技术及技巧,并严格按相应的操作程序进行操作,以确保献血者安全及血液质量。成分血采集工作的基本流程包括献血者的招募和征询→体格检查→血液初筛检测→献血者核对评估→血细胞分离机开机装耗材、预冲→献血者静脉穿刺连接机器→血液成分采集、回输→血液产品收集→贴签、热合和留样→成分血暂存→献血告知→交接核对→献血现场整理等。
(一)成分血采集前准备
1.选择献血者及穿刺静脉
(1)献血者捐献成分血,献血时间较长,在献血过程中,有一定的血液离开献血者身体在管道内循环,需使用枸橼酸盐抗凝,所以在用机器进行成分血采集时会有一定量的抗凝剂进入体内,可能对献血者产生一定的影响。
(2)成分血采集,对穿刺静脉的要求也较高。献机采血小板时,献血者一侧肘部至少应有一条以上较粗的、充盈的、弹性好的、易固定的静脉;做双针机采血小板、白细胞和机采年轻红细胞时,献血者双侧肘部都应至少有一条以上较粗的、充盈的、弹性好的、易固定的静脉。
(3)在对献血者进行动员、征询、体检、检验,确定符合捐献相应的成分血条件后,仍需对献血者进一步核对,并对献血者进行深入的沟通与评估,使献血者愉快捐献成分血。
(4)献血前一天,献血者不宜吃油腻食物,应以低脂肪饮食为宜;不宜饮酒;献血前不要空腹、不宜熬夜,睡眠要充足;献血者做好自己的工作安排,以便有充足的时间完成成分血捐献及献血后休息。
2.选择耗材
(1)必须使用符合国家食品药品监督管理局批准注册的一次性血液成分分离管路。
(2)检查一次性耗材外包装有无破损,需检查耗材管路上的密封保护帽,针头是否脱落、管路内是否有异物,检查ACD-A、氯化钠溶液是否有浑浊或异物及霉变现象;如发现异常按程序报废,不能使用。
3.安装管路
(1)工作人员必须根据仪器设备的操作手册要求操作,正确安装管路。
(2)管路安装正确与否直接影响单采成分血的过程能否顺利进行,以及采集的血液成分质量。
(二)成分血采集基本程序
1.开启血细胞分离机并进行初始化。
2.静脉穿刺前按照血细胞分离机操作说明,选择拟单采的血液成分的采集程序并设定相应的参数;同时为了预防献血者发生枸椽酸盐中毒反应,采血前可选择补充钙剂。
3.机采医务人员应严格执行《静脉穿刺和血液采集操作规程》和《血液标本采集(留取)、暂存、运送操作规程》进行静脉穿刺和留取血液检测标本,避免穿刺不顺或血肿等。
4.静脉穿刺成功后,按照血细胞分离机操作手册操作,采集成分血。
5.采集过程中,医师和机采工作人员应持续观察机器的工作状态、抗凝剂的滴速,并对献血者进行监护,以确保献血者的献血安全和产品的质量。
6.做好采集过程的各项关键指标的记录,包括采集时间、品种、体外循环的血量、抗凝剂的使用量、交换溶液的量、血液成分的质量以及献血者的状态等。
7.机采工作人员认真正确做好各血液成分的标识和贴签工作,同时,做好各血液成分的暂存和移交工作。
8.如果单采的是血小板,则按照不同的血细胞分离机的要求使血小板充分解聚并混匀,在(22±2)℃的环境下振荡保存;其他成分血也应在采集后立即置入相应的贮存温度中保存。
(三)成分血采集注意事项
1.由于单采成分血的过程是依靠血细胞分离机的管路和转动泵将血液回输入献血者体内,因此理论上有发生空气进入血管造成空气栓塞的风险;为避免发生空气栓塞,穿刺前必须清除进血管路和返血管路的气体;目前使用的血液分离机都有预处理或初始化程序排除管路内气体;常见有两种形式,一种为使用液体预充管路排除气体,如抗凝剂或盐水;另一种形式为采取真空抽压排气的方式排除气体。
2.运行过程中仪器设备报警应立即停止采血并查找原因;发现采血耗材有漏液现象,所采成分血报废。
3.应按不同的全血流速调整抗凝剂滴速,抗凝剂过多会引起中毒造成低钙血症;而抗凝剂过少,又会引起血小板的聚集形成凝血块。
4.机采工作全过程必须有经培训合格的医护工作人员负责全程的监护。
二、红细胞采集(机采年轻红细胞)
年轻红细胞是指网织红细胞与成熟红细胞之间的红细胞,其存活期明显长于成熟红细胞,半存活期为44. 9天,而成熟红细胞仅为29天。
(一)机采年轻红细胞献血者要求
机采年轻红细胞时,除了符合献血标准外,双针采集要求献血者双臂肘窝静脉暴露良好,血常规检查需符合:HCT≥40%,Hb:男≥120g/L,女≥115g/L,WBC为(4~10)×10 9/L,PLT为(150~350)×10 9/L。
(二)血细胞分离机采集年轻红细胞程序(以COBE 2991血细胞分离机为例)
1.选择好献血员,开启血细胞分离机并进行初始化;按血细胞分离机操作手册要求步骤安装一次性管路耗材。
2.静脉穿刺前按照血细胞分离机操作说明,选择采集年轻红细胞的程序并设定相应的参数和预冲管路。
3.机采护士进行静脉穿刺和留取血液标本,避免穿刺不顺或血肿等。
4.静脉穿刺成功后,按照血细胞分离机操作显示屏提示操作,采集成分血。
(1)如选择全血流速50ml/min,血浆流速85%,离心速度为1000rpm,IDO~6等,一般每个献血者需处理5000~7000ml全血。
运行程序中,根据屏幕提示调整参数,例如血浆流速由85%调到97%,离心速度由1000rpm调至750rpm,当处理全血2800~3000ml后,离心速度降至600rpm。
(2)医师和机采工作人员应持续观察机器的工作状态、抗凝剂的滴速,并对献血者进行监护。
(3)收集袋充满后需腾空收集袋,继续采集至设定的年轻红细胞终点量,收集年轻红细胞,回输血浆给献血者。
5.记录 包括采集时间、品种、体外循环的血量、抗凝剂的使用量、交换溶液的量、血液成分的质量以及献血者的状态等。
6.采集结束,拆卸管路,关机。
7.产品及血液标本贴签标识、核对、交接。
8.年轻红细胞保存于(4±2)℃储血冰箱中。
9.献血者护理及健康指导。
10.发放献血证及纪念品,告知下次可献血时间。
11.血液检验结束后将检验结果告知献血者。
三、白细胞(粒细胞)采集
白细胞采集是通过采用血细胞分离机在全封闭条件下自动将全血中的粒细胞分离出并悬浮在一定量血浆内,制成浓缩白细胞。
(一)献血者要求
除符合捐献全血要求外,尚需具备:
1.血常规检查 WBC为(6~10)×10 9/L,HCT≥36%,Hb:男≥120g/L,女≥115g/L,PLT为(150~350)×10 9/L。
2.双上肢肘窝静脉暴露良好。
(二)以Spectra PMN血细胞分离机粒细胞采集操作为例
1.装入一次性管路 开机,系统初始化;按提示安装一次性耗材管路。
2.灌注一次性耗材管路
(1)在屏幕中选择白细胞(WBC)设定程序。
(2)在白细胞程序中选择粒细胞(PMN)采集。
(3)关闭输入和回输管线上luer接头旁的开关,关闭生理盐水输入和回输管线上的滚动夹。
(4)将抗凝剂管线(橘黄色针)连接到抗凝剂容器,将抗凝剂管线放在抗凝剂水平探测器中,将白细胞去除管路连接到液体容器。
(5)将生理盐水输入和回输管线连接到0. 9%的氯化钠容器上。取下帽盖,将塑料长针放在长针端口里。在插入金属长针前,用酒精消毒注射端口。
(6)将滴室注满一半。
(7)打开生理盐水输入及回输管线上的滚动夹,按下“CONTINUE”键进行灌注。
(8)确保在屏幕的右下角显示“PMN”,灌注抗凝剂的管线,灌注PMN管路。
(9)打开输入和回输管线上的弹簧夹,使得生理盐水在重力作用下充满luer锁接头,关闭弹簧夹:灌注输入、回输接头和Spectra THERM线。
(10)关闭生理盐水输入管线上的滚动夹,按下CONTINUE以检测抗凝剂比率,当系统进行一系列的自检时,抗凝剂和输入泵启动和停止。
(11)警告:在进行报警测试前,请不要连接献血者/患者,进行报警测试。
3.输入献血者/患者资料
(1)输入献血者/患者性别、身高、体重,按“ENTER”。
(2)系统显示估计的总血容量和供血者/患者资料:总血容量=(_)ml。(_cm,_ kg,男/女性)。OK(是/否)?
(3)以整数形式输入供血者/患者操作当天测得的血细胞比容后,按“ENTER”。
(4)机器系统利用供者/患者资料来计算并在目标运行结果屏幕上显示如下信息:输入容量=__ml,输入流速=_,时间=_分钟,采集=_。OK(是/否)?
4.连接献血者/患者
(1)输入献血者/患者和实验室检查值,根据标准操作程序验证顺序。
(2)当屏幕显示如下,请进行步骤1)到步骤4)的操作:连接输入和回输管线。关闭生理盐水输入管线。按“CONTINUE”以运行。
1)在献血者上肢部位进行输入及回输针头静脉穿刺,或者根据标准操作程序,将输入及回输管线连接到血管接入装置,留取血液标本。
2)打开输入及回输管线上的弹簧夹。
3)调整生理盐水回输管线上的滚动夹,保证回输管线内有生理盐水滴注。这样可以防止回输管线发生血液凝集。
4)关闭生理盐水输入管线上的滚动夹。
5.开始运行
(1)按“CONTINUE”,检查运行屏幕以确保泵流速适合于该操作程序。机器系统将灌注生理盐水分流到废物袋。
(2)关闭回输生理盐水线路上的滚动夹(界面显示:关闭生理盐水回输管线)。
6.快速开始
(1)在快速开始过程中,机器系统自动调整血浆泵流速以建立界面,快速开始需要精确的献血者/患者血细胞比容,以正确建立界面。
(2)快速开始完成后,采集阀会移动到采集位置(系统处理200ml红细胞后快速开始完成)。
(3)快速开始完成后需要更改collect泵流速到3ml/min和处理血量到8000ml。
7.使用白细胞色标监测界面,在色标上7. 5%的血细胞比容范围内实施PMN采集操作程序
(1)将色标插在最细的透明采集管下,位于在其自离心舱引出处,正好在多腔管接头的下面。
(2)将色标上的有色长方形与采集管上的颜色相比较
1)如果采集管的颜色对于所采集细胞类型来说太深,每隔3~5分钟将血浆泵流速降低0. 3~1. 0ml/min。
2)如果采集管的颜色太浅,以同样的方法增加血浆泵流速。
(3)一旦建立了最佳界面,继续用色标监测采集管里的产品及调整血浆泵流速。
8.结束采集 当PMN采集达到设定目标结果时,采集结束。
9.开始回洗
(1)按“回洗”键:关闭输入管线上的弹簧夹。打开输入生理盐水管线上的滚动夹:按“CONTINUE”进行回洗。
(2)重要提示:密封采集管线,夹闭并断开采集袋,取下采集袋和血浆袋。
(3)根据标准操作程序,从血管通路装置上断开输入针头或断开输入管线,拔出输入针头。
10.断开献血者/患者连接
(1)当回洗完成后,关闭回输管线上的弹簧夹、断开回输管线。拔出回输针头。
(2)确保夹闭所有的液体管线,这样当您卸下一次性管路的时候液体不会渗漏。
(3)按“CONTINUE”。
(4)系统暂停,记录最终值。当泵卸载时,系统则删除最终值。按“CONTINUE”进行卸载。
(5)记录采集物中的抗凝剂量。
11.卸下一次性管路 夹闭并断开采集袋,按“CLEAR”结束。
12.采集结束,粒细胞产品收集、献血者处理与采集血小板相同。
13.粒细胞产品
(1)本制品平均含有中性粒细胞含量1. 0×10 10个,每单位(一个治疗量)容量约150~200ml。
(2)血细胞分离机采集的粒细胞中会污染一些红细胞,粒细胞制备后应尽快输用,一般于(22±2)℃静置保存,保存时间为8~24小时,因粒细胞离体后功能很快降低。
(3)浓缩白细胞制品内含有一定量的淋巴细胞,输前必须经γ或X射线辐照杀灭淋巴细胞。
四、血小板采集
血小板采集是血站最主要的成分血采集工作。血小板捐献者多为固定献血者,机采血小板1个单位(1个治疗量)含血小板2. 5×10 11个,保存期为5天。为保证临床血小板使用需求和防止过期报废,应按计划采集,最好提前1~2天预约和确认参加机采的献血者。
(一)设备、材料
1.血细胞分离机及配套专用血小板耗材。
2.ACD-A抗凝剂、生理盐水,10%葡萄糖酸钙等。
3.试管、口罩、帽子、无菌棉枝、无菌棉球、皮肤消毒剂、速干手消毒剂、医用胶布、创可贴、直通针、插针套座、弹力绷带、手垫、垫手纸等。
(二)献血小板者要求
1.捐献血小板的献血者首先要符合采全血的全部体检要求,包括血液化验检测指标;另外根据机采血小板的特点,献血者还要符合以下要求:血常规检查中血细胞比容≥36%;血红蛋白:男≥120g/L,女≥115g/L;白细胞(4~10)×10 9/L;血小板计数:采单份时为(150~450)×10 9/L,采双份时为(250~450)×10 9/L,预测采后血小板计数应≥100× 10 9/L。
献血者血小板计数是主要参数,但不是唯一参数。因为献血者捐献1份血小板,将失去大约250×10 9个血小板,而献血者血小板总数与身高体重(血容量)等因素有关。新型的血细胞分离机可自动测算出采集血小板后机体剩余血小板计数。
2.献血者静脉充盈良好 血小板采集过程大约需要40~90分钟,在此期间不间断采血,而且有一定的血液流速,所以要求献血者静脉充盈良好;依据血细胞分离机机型不同,对选择献血者静脉要求也不同;单针采集要求选择良好的单侧上肢静脉;而双针采集一般要求双侧静脉都良好。
3.献血前饮食、休息 为防止机采期间乳糜血的发生,要求献血者在献血前不得进食高脂肪食物,如肉类、蛋类、牛奶、豆浆、花生和瓜子类食物。
献血前一天最好多饮水,当日必须吃早餐,但不得食用上述高脂食品,也不要空腹献血,以减少献血不良反应的发生。
献血前应保证充足的睡眠和稳定的情绪,避免精神紧张,全身放松,以减少献血不良反应。
4.献血前不能服用的药物 有一些抗血小板聚集或抑制血小板代谢的药物,如阿司匹林、吲哚美辛、保泰松、布洛芬、维生素E、双嘧达莫(潘生丁)、氨茶碱、青霉素及抗过敏类药物等可影响血小板的功能,在献血前一周不得服用此类药物。
5.献血间隔 单采血小板献血间隔:不少于2周,不大于24次/年;献全血3个月后可献血小板,献血小板4周后可献全血;因特殊配型需要,由医师批准,最短间隔时间不少于1周,但血小板计数应>150×10 9/L。
(三)血小板采集程序
不同机器型号的血细胞分离机采集血小板的基本程序类似,但细节不同。机采操作人员必须熟练掌握所使用的机器型号的性能及操作,并严格按操作规程要求进行血液采集,严密监护献血者。
由经培训合格的机采工作人员负责机器的具体操作,在经过健康征询、体检、血液初筛检验合格、献血者身份核对、献血者沟通与评估,确定捐献血小板的数量等程序,准备就绪后进行血小板采集。
1.开机
选择血小板采集程序,开机后机器完成自检,屏幕显示相应界面。
(1)触摸“献血者信息”界面,按要求输入献血者的性别、身高和体重后,系统会自动计算出该献血者的总血量。
(2)进入要求输入该献血者的血型、血细胞比容以及血小板计数等数据的界面;正确输入相关数据。
(3)选择采集操作程序:进入“操作程序选择”的界面,触摸框中的箭头选择所需的血小板采集操作程序,触摸“确认程序”。
2.安装管路
触摸“装载系统”,参照“操作手册”安装管路。
(1)打开管路包装并检查:打开配套专用的一次性管路的包装,检查有无破损、霉变等;检查血液保存液有无异物,沉淀等;拿出排气袋及产品袋,将它们悬挂在挂液架上,同时将连接袋子的管路置于显示器屏幕之后;将献血者管路从其包装取出后放在机器左上方的凹槽内。
(2)装载管路:按正确步骤逐步安装管路各部件。
(3)检查安装情况:确保管路及泵、阀门以及传感器正确安装到位;确保针头管路及样品袋管路上的夹子没有夹闭。
(4)系统启动回输泵以排除袋中的空气。
3.管路测试及抗凝剂连接、灌注
(1)按照提示,夹闭献血者管路和样品袋管路上的夹子,确定后系统进行配套管路测试;并测试抗凝剂、回输以及采血泵;这时一定不要连接抗凝剂。
(2)抗凝剂连接:测试完成,系统提示连接抗凝剂;这时请把抗凝剂连接到抗凝剂管路上(有一个橙色的针头的管路);通过用手指对滴液室进行挤压及松开,将滴液室灌注到其刻度线位置;通过上下“拉线”动作,使抗凝剂管道置于抗凝剂传感器中;请确保抗凝剂过滤器在抗凝剂传感器的下方。
(3)抗凝剂灌注:触按“继续”按钮,进行抗凝剂灌注;灌注结束后,显示“开始献血者准备”。
4.连接献血者、抽取血样及预冲系统
(1)确定献血者及输入的资料信息:
献血者性别、身高、体重、血型、血细胞比容、血小板计数等,进入血小板采集量选择界面。双份单采血小板选择5. 5×10 11,单份单采血小板选择3. 0×10 11,血浆200ml;输入无误后,点击“开始献血者准备”。
(2)静脉穿刺:
献血者准备充分后在献血椅上舒适躺(坐)好,护士选择充盈有弹性的上肢肘部静脉,按《静脉穿刺和血液采集操作规程》进行穿刺部位皮肤消毒、静脉穿刺,成功后固定好针头。
(3)留取血液检测样本:
松开针头管道夹子和留样袋管道夹子,使约15~20ml的血液流入留样袋,然后夹闭留样袋夹子,将留样袋的针头(或另备的留样针)刺入负压标本试管留样5ml并摇匀(若做核酸检测多留1管,Rh阴性者另留1管);针头管道夹子保持开着。
(4)开始采血、血液预冲灌注系统:
再次确定信息输入无误后,再触摸屏幕下方的“开始采血”,献血者的血液灌注管路套件(抽取管路、离心机和回输管路);此分离机自动采集血小板,在最初2~3个采血和回输周期后开始采集血小板。
5.血小板采集、监护献血者
(1)血小板的采集需要经过多个采血和回输的周期而完成。
(2)监护献血者及操作过程
1)采集过程中密切、频繁观察献血者情况,监护献血者的抗凝剂反应(如刺痛感或其他反应)并按需要调整抗凝剂进入体内的量,确保献血者的舒适及安全,确保血小板产品的质量及产量。
2)监视在操作过程中屏幕上的采集时间、采血压力和回输压力、已采集到的血小板量和要采集的总量等数值,观察管路和血小板袋子里的血小板凝聚情况以调整抗凝剂量。
3)当机器发出警铃声时必须查明原因并及时处理。
(3)操作程序参数及献血者信息更改及调整:如果需要,可对操作程序参数及献血者信息进行相应的改变及调整;一旦机器开始回输血液,就不能够再改变献血者信息。
(4)预防并及时处理可能发生的献血反应:血小板采集开始及采集中可口服10%葡萄糖酸钙10ml,有口唇麻木时可重复服用,可进食饮料等。
6.采集结束,收取血小板、拆卸管路
(1)当血小板采集达到设定的数量后,采集结束,回输其他血液成分给献血者。
(2)断开献血者连接:回输完毕后,用止血钳夹紧产品管路及抗凝剂管路,夹闭采血针管夹子,从献血者手臂上迅速拔下采血针,敷料覆盖并按压穿刺部位15分钟;小心热合并分离针头,放入利器收集容器。
(3)收集(混匀)血小板
1)排尽产品袋中的气体,用热合(或止血钳)分离产品收集袋。(有的机型采集浓缩血小板后需将血浆加入并混匀:双手持血小板收集袋两端上下摇动,把贴壁的血小板与血浆充分混匀至无肉眼可见聚集血小板颗粒为止;如持续摇动5分钟仍无法解聚,将产品放置于血小板振荡箱中继续解聚);严禁捏搓血小板。
2)在血小板袋采集管上热合出一段20~30cm长的血浆标本(交检验科冻存)。
3)若采集的是2U血小板,则将血小板平分入2个血小板袋中(利用天平称量),热合离断连接管,分为2袋1U的血小板。
4)正确粘贴好标签,确保同一献血者的血袋、标本管、献血记录一一对应。血小板及标本按规定移交相关部门。
(4)点击确定脱离献血者后,机器提示退出管路。按照装管道时的相反顺序拆卸管道。
(5)将废血袋及管路等放入医疗废物专用容器中,按规定移交。
7.关机
(1)将屏幕显示的单采信息记录到《单采献血表》上,包括处理的血量、血液保存液的用量、血小板量、血浆量、抗凝剂量、生理盐水量、采集时间、循环数,血小板的外观,献血者有无献血反应等,并签名。
(2)触摸屏幕下方的“重置机器”,机器自检并重新启动,进行下一例采集或关机断开电源。
(四)献血后护理和健康指导
因机采献血时间较长,除参照献全血者的献血后护理和健康指导外,还要结合机采的特点给予护理和指导。
1.献血者现场护理
(1)正确指导献血者按压针眼处15分钟后松开,医务人员除再次检查静脉穿刺孔部位有无渗血或出血等异常现象外,尚要检查绷袖带处有无异常情况。
(2)机采结束后应主动为献血者提供点心、牛奶等食品;医务人员监护在休息区的献血者,休息至少15分钟后经医务人员确认许可方可离开,以防止献血不良反应的发生。
(3)告诉献血者捐献机采血小板和捐献全血的具体间隔时间,并询问和记录献血者是否可参加应急献血及下次可以参加捐献的时间,同时告诉献血者下次献血前应注意的事项。
2.机采献血后献血者注意事项
将主要内容包括联系电话印制成书面材料,当面告知并将其发给每位献血者。
(1)保护好穿刺部位上的敷料至少4小时不脱落,但不要超过24小时,以防穿刺孔被擦伤或污染引起感染。
(2)献血后24小时内不要做剧烈运动或重体力劳动以及高空作业和过度疲劳,以防发生意外,要有充足的睡眠。
(3)献血后半小时内不要吸烟,多饮些水或其他饮料,在随后的几天内也应多摄入液体,有助于血容量恢复。
(4)献血后当日正常饮食,避免饮酒,避免暴饮暴食,食用易消化的食物和水果。
(5)部分献血者献血后有疲劳或困倦感,这属正常的生理反应,或因情绪波动所致,不必担心。调整情绪,注意休息。
(6)若发觉采血部位或全身异常、不适,应及时与采血机构取得联系,必要时采血机构应派专业人员上门访视,根据具体情况作适当处理。
3.献血者休息,献血证、纪念品发放和致谢
(1)发给献血者无偿献血证和纪念品,并请其核对内容是否有误;表示感谢,同时鼓励其参加再次献血。
(2)告知无偿献血后的优惠政策、待遇及办理程序。
(3)回访,定期召开无偿献血者联谊会,听取意见及建议。
(五)机器的清洁消毒,维护和保养
1.每天工作完毕,用清水湿润干净的抹布清洁机器表面。
2.每周清洁机器前面板上的传感器和阀门。
3.定期清洁泵罩和泵转子,定期清洁填充器。如有渗漏,可用0. 25%次氯酸钠漂白溶液消毒,然后用清水清洁干净。
4.每年至少由厂家工程师对机器进行一次全面的维护服务。
五、血浆采集
用血细胞分离机采集血浆(机采血浆),在我国多局限于单采血浆站使用,主要用于血浆蛋白制品如白蛋白、免疫球蛋白、Ⅷ因子浓缩剂等的制备。国内每次采血浆量600ml,每次采血浆间隔为两周,参考采浆量为每人每年不超过10L。血站单采血浆可用于采集特殊传染病治愈后的抗体血浆用于特殊患者的免疫治疗。
采集原理:机器将定量的抗凝血液用一定的速度离心后,根据血液中不同成分的比重,可以快速、高效地分离出血浆成分,而将红细胞回输给供血浆者。经过多次自动循环,可以收集到规定量的血浆。
(一)单采血浆机采集血浆程序
1.开机 升高抗凝剂支杆→将秤臂转向机器的前方→接通电源开机;进入准备工作菜单→校正电子秤、对时→按键进入采浆工作菜单。
2.设备自检、设置参数。
3.安装耗材→管路→安全项目自检,连接抗凝剂、充液排气。
4.采血准备
(1)在献浆者手臂上缠上袖带,袖带下缘与针眼的距离要>9cm;(注:袖带头向下在献浆员臂上缠绕,袖带的管路向上从臂部过来,袖带缠好后一直保留到操作结束);按袖带键给袖带加压,灯亮时袖带加压,至达到预设袖带压力值。
(2)静脉穿刺:严格执行《静脉穿刺和血液采集操作规程》和《血液标本采集(留取)、暂存、运送操作规程》进行单臂静脉穿刺和留取血液标本。
5.采集血浆
(1)静脉穿刺成功后,按“采血”键,这时血浆袋重量为零,自动采血浆机开始运行。“采集血浆”,开始对离心杯内进行充液(全血),同时将离心杯内消毒的空气排放到血浆袋。在采全血模式中,注意观察全血流量,有必要时调节全血泵转速或者改变袖袋压力值,使之与流量相匹配;当流量不畅时,操作人员应找原因解决,注意观察献血浆者反应。观察血浆颜色,注意有无异色血浆、脂浆、溶血。
(2)细胞回输:上一循环时自动设定的收集量已达到,或血浆管路探测到空气,屏幕显示“回输准备”,离心机停止后将自动进入红细胞回输阶段;回输开始,显示“回输细胞”,将离心杯内液体排空,然后仪器到抽血状态/模式,下一个采血程序将自动开始,直到血浆量达到设定值时全部程序结束(注意:若收集的血浆颜色偏红,说明有红细胞进入血浆,要随时调整程序,降低采浆量,再观察血浆颜色是否正常)。
(3)当血浆采集量达到预定量时,回输终止后,自动采浆结束。
6.记录 血浆采集量、盐水补充量、抗凝剂使用量、全液量统计、循环次数及持续时间如实记录于《采血浆记录单》上。
7.移开献浆员袖袋。
8.用夹片夹住采血管路,退出针头。
9.在离心杯出口处10cm左右先用止血钳夹住血浆管道,以免血浆受污染或倒流,然后与离心杯分离。
10.取下血浆袋,送热合室。
11.拆下用过的一次性耗材置入医疗废物桶,采浆程序结束。
12.关闭采浆机。
(二)全自动血细胞分离机单采血浆操作程序
1.开启电源。
2.进入“配置”选择“血浆”,设置要采集的目标血浆量(最多设置6种目标血浆量),然后选择“程序优先次序”设置所要采集的目标产品组合;如果只采集血浆产品,则只要设置目标血浆量,同时将血小板设为最小量(如0. 5U),红细胞设置为0。
3.安装管路 按说明安装耗材管路并灌注。
4.输入献血员信息 包括性别、身高(cm)、体重(kg)、血型、血细胞比容(%)及血小板计数。
5.静脉穿刺 触按“开始献血员准备”按钮,根据屏幕出现的画面进行静脉穿刺。
6.采集血浆 穿刺完成处理好后,按“开始运行”进入采集过程;采集运行过程中,机器将所需采集血浆收集入血浆产品袋,其他血液成分同时回输给献血者。
7.血液成分回输 设定采集目标血浆量达到后,机器自动提示进入最后回冲,将管路中剩余血液成分回输给献血者后运行结束。
8.卸载管路。
六、外周血造血干细胞采集
外周血造血干细胞捐献也是利用血细胞分离机进行血液成分采集的一种。一般需要经过外周血造血干细胞的动员,才能进行采集。
(一)外周血造血干细胞的动员
正常人外周血中干细胞只有骨髓中造血干细胞量的1/10,为保证外周血造血干细胞(PBSC)移植的有效剂量,必须把造血干细胞从造血部位动员到循环池中。常用的动员剂主要有抗肿瘤药物如环磷酰胺(CY)、柔红霉素等,各种重组的人造血生长因子如粒系集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3、干细胞因子(SCF)等,其他类动员剂如硫酸葡聚糖、皮质激素等。卫生部《非血缘造血干细胞采集技术规范》(卫医发〔2006〕253号)规定,外周血动员剂及用量是粒细胞集落刺激因子(G-CSF)5μg/(kg•d),4~6日。
(二)外周血造血干细胞的采集
用上述动员方法有效地诱导动员后进行干细胞采集。造血干细胞悬液50~200ml/(人•次),每次循环处理血量(150~200ml/kg)不多于15 000ml。5~7天内可重复采集单个核细胞2~4次。
根据不同型号血细胞分离机的要求,选择外周血造血干细胞采集程序并设定相应的参数,按照屏幕提示进行操作。
1.外周血干细胞采集(MNC)操作程序
(1)选择程序:开机,选择MNC(单个核细胞)采集程序。
(2)安装消耗品管路:连接盐水、抗凝剂,按继续键;打开盐水、抗凝剂夹子,造液面,按继续键。
(3)消耗品管路检测及初始化:检测消耗品管路安装、消耗品密闭性,用盐水预充消耗品管路。
(4)输入参数:在选择程序后、初始化过程中均可输入参数,按输入参数键输入参数,按保存键传输数据。
(5)采集程序建立:初始化完成后进入程序建立屏;按开始针头初始化键实施针头排气,待开始采集键变绿,准备双臂静脉穿刺建立进血管路、返血管路;穿刺完成后按开始采集键;(袖带充气功能:将袖带绑在采血端上臂上,按袖带压键,充气加压)。按程序显示键返回程序建立屏。
(6)干细胞采集:①注意观察进血管路、返血管路压力情况,调整血流速度;②采集过程中,可根据需要按下暂停/终止键,选择滴注盐水、执行还输或终止程序;按恢复程序键可恢复采集程序。用于出现采集反应、重新穿刺或提前终止程序。
(7)采集结束,执行还输:当处理血量达到终点量值时,提示执行还输,按接受键确认。
(8)采集过程完成,拔掉采血管路针头。
(9)转输血浆:血浆转输完成,提示拔针,按接受键。拔除返血管路针头。
(10)拆卸消耗品管路,关机,拆卸管路前关闭所有夹子。
(11)记录程序报告:ACD用量、全血采出循环量、采集时间、盐水用量等。
2.外周血干细胞采集注意事项
(1)由于干细胞采集需要处理大量的血液,因此抗凝剂用量较大,需要预防枸橼酸钠中毒;可在采集前、中预防性口服葡萄糖酸钙。
(2)采集过程中密切观察献血者血压、脉搏、神志,询问有无头晕、口唇和手足麻木等症状,有任何不良反应时应及时处理。