五、实验动物的采血方法
(一)大小鼠的采血法
1.鼠尾取血
将大鼠或小鼠置于固定盒内(或由助手抓紧),露出尾巴,用手揉擦或用温水(45℃)加温鼠尾,也可用二甲苯或酒精涂擦鼠尾,使鼠尾充分充血后,用剪刀剪去尾尖,尾静脉血即可流出,用手轻轻的从尾根部向尾尖部推挤,即可收集到少量血液(图3-13)。
图3-13 鼠尾静脉取血
实验时如果需要间隔一定时间,反复采集少量血液,则每次采集时,可将鼠尾剪去一小段,取血后,用棉球压住止血,并用液体火棉胶涂于伤口处,以保护伤口。
2.眼眶动脉和静脉取血
实验者用左手抓住鼠,尽量绷紧头部皮肤,将动物倒持压迫眼球,使其充血,右手持一弯钩小镊子在鼠的眼球根部将眼球摘去,血很快流出即可接取。这种采血方法在采血过程中动物没有死,心脏仍在跳动,因此采集到的血比其他方法要多。另外,也可从眼眶后静脉丛取血,用特制的硬质玻璃管(内径1.0~1.5mm)先吸取抗凝剂(1%肝素)湿润其内壁,再从内侧眼角插入约4~6mm,由于血压的关系,血液就流入玻璃管。采集到所需要的血液量后,除去加于颈部的压力即可止血。此种方法可以采集较多量的血液,动物休息数分钟后,可继续在同一穿刺孔重复采集血液(图3-14)。
图3-14 大鼠眼眶取血
3.心脏取血法
将鼠仰卧固定在鼠板上,若是大鼠,固定前最好用乙醚麻醉。剪去心区部位的被毛,用碘酒、酒精消毒皮肤。在左胸3至4肋间,用左手食指摸到心跳最明显处,右手持注射器垂直进针,当感到有脱空感时,说明针头已插入心脏(图3-15)。由于心搏的力量和血压的关系血液自然进入注射器。如果是小鼠的话,也可一人徒手采血。即左手拇指和食指握住颈部,小指压住鼠尾使之仰于左手内,右手持注射器在左心区经消毒处理的部位,心博最强处刺入心脏,即可采集血液。
图3-15 鼠心脏取血方法
4.急性断头取血
如果是一次性急性实验,不需要保留鼠的活体,实验后可采用断头取血。操作者左手拇指和食指握住鼠颈部,头部朝下,用剪子在颈头之间剪断,提起动物将血液滴入容器内。大鼠可采血10mL左右,小鼠可采血1~2mL左右。
(二)兔的采血法
1.耳动脉采血法
将兔置于固定器内固定好,用手轻揉或用加热的方法使耳充血,可发现在其中央有一条较粗颜色鲜红的血管,即为耳中央动脉,左手固定兔耳,右手持注射器在中央动脉末端,使针头沿动脉平行方向穿刺入动脉,血液即可进入注射器内。取血后用手压迫止血。
2.耳缘静脉采血法
将动物固定好后,用手轻揉动物耳缘,待耳缘静脉充血后,在靠近耳尖部的静脉处,用针头刺破静脉,血液即可流出,也可用针头沿着耳缘静脉远端刺入血管,抽取血液,一次可采血5~10mL(图3-16)。
图3-16 兔耳缘取血
3.兔颈动、静脉采血法
采血前将动物麻醉固定后,暴露颈部皮肤,将颈侧皮肤切开,分离出颈动静脉。根据所需血量可用注射器直接采血。注射器针头用7号针头。进针方位:动脉取血时,将注射器与血管平行方向向心端处刺入。静脉取血,则将注射器由近心端沿血管平行方向刺入,使针头一直深至颈静脉分叉处,即可取血。
(三)犬、猫的采血法
1.前后肢皮下静脉采血法
此法主要是前肢的桡侧皮静脉和后肢外侧的隐静脉为采血部位。桡侧皮静脉位于前肢前部,在下1/3处向内侧走行。犬可侧卧或站立固定,助手从犬的后侧握住肘部,使皮肤向上牵拉、静脉怒张,也可用橡皮筋结扎使静脉怒张。操作者位于犬的前面,注射器针头由前腕的上1/3处刺入静脉,直接抽取血液。抽时速度要慢,速度过快针口容易吸附血管内壁,血液不能进入注射器。抽血时要及时解除加压在静脉处的手或橡皮筋;取血完毕后,应立即用棉球压迫止血。
隐静脉前肢位于跗关节外侧,距跗关节上方5~10cm处的皮下,采血时,使犬侧卧固定不易滑行,由另一人握住膝关节上部或用橡皮筋扎住上部,使静脉怒张。操作者位于犬的腹侧,手持注射器采血,其余方法操作同上。
2.隐静脉采血法
隐静脉前肢位于跗关节外侧,距跗关节上方5~10cm处的皮下。采血时,一人使犬侧卧固定血管不易滑动,由另一人握住膝关节上部或用止血橡皮筋扎住上部,使静脉怒张。采血者位于犬的腹侧,手持注射器采血,其余方法同前肢皮下静脉采血相同。
3.股动脉采血
在动物清醒状态下将犬卧位固定于犬解剖台上。伸展后肢向外伸直,暴露腹股沟三角动脉搏动的部位,剪去毛,用碘酒、酒精消毒。左手中指、食指探摸股动脉跳动部位,并固定好血管,右手取接有5号针头的注射器,针头由动脉跳动处直接刺入血管,刺中后一般可见血液流入,若没有血液流入,可变换方向移动针头。抽完后迅速拔出针头,用干药棉压迫止血2~3分钟(图3-17)。
图3-17 犬股动脉取血
猫的采血方法基本与犬相同。
(四)猴的采血法
猴与人类的采血方法相似,常用方法有以下几种:
(1)毛细血管采血:需血量少时,可在猴拇指或足跟等处采血。采血方法与人的手指尖或耳垂处的采血法相同。
(2)静脉采血:一般取后肢皮下静脉及颈外静脉进行采血。后肢皮下静脉采血时在腿上部用手或橡皮筋结扎使静脉怒张,直接抽取血液。采血时速度要稍慢,取完后放开加压的手或橡皮筋,注意止血。
(3)动脉采血:取血量多时常选用股动脉采血。方法与犬股动脉采血相似。